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江蘇綠葉生物科技有限公司

抗血清的制備方法

時(shí)間:2015-9-10閱讀:694
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    昨日,來自南京農(nóng)業(yè)大學(xué)王老師抗血清的制備方法和過程,我司趙熱情地一一解答。

抗血清指含有抗體的血清。傳統(tǒng)的抗血清制備方法是將某種抗原通過多次注入動(dòng)物,數(shù)十天后或數(shù)月后,采集動(dòng)物血,立即分離出血清。此抗血清在保存或應(yīng)用前必須作效價(jià)和特異性鑒定及純化。

(一)免疫動(dòng)物的選擇  免疫動(dòng)物的選擇基本要求:  1.抗原與免疫動(dòng)物的種屬差異越遠(yuǎn)越好。  2.動(dòng)物必須適齡、健壯、無感染、體重合乎要求。  3.不同動(dòng)物對同一免疫原有不同的免疫應(yīng)答表現(xiàn)。因此針對不同性質(zhì)的免疫原,選用相應(yīng)的動(dòng)物。蛋白質(zhì)抗原大部分動(dòng)物皆適合;甾類激素多用家免;酶類多用豚鼠。  4.抗血清要求:為Rrabbit)型或Hhorse)型血清。R型抗血清是以家兔為代表的小型動(dòng)物產(chǎn)生的抗血清,能和很小量抗原結(jié)合形成沉淀線,而H型抗血清則以馬為代表的大型動(dòng)物產(chǎn)生的抗血清,較少用于沉淀反應(yīng)。  此外需要制備大量免疫血清時(shí),應(yīng)選用馬、綿羊等大動(dòng)物;若需要量不多,則選用家兔、豚鼠和雞等小動(dòng)物。

(二)免疫方法及途徑  1.免疫原的注射劑量:應(yīng)考慮抗原性強(qiáng)弱、分子量大小、動(dòng)物的個(gè)體狀態(tài)和免疫時(shí)間。抗體需要量多,時(shí)間間隔長,劑量可適當(dāng)加大。  2.免疫途徑:通常有靜脈、腹腔、肌肉、皮內(nèi)、皮下、淋巴結(jié)及足掌等。若抗原寶貴可采用淋巴結(jié)內(nèi)微量注射法;半抗原宜皮內(nèi)多點(diǎn)注射。  3.免疫方案:根據(jù)設(shè)計(jì)的目的要求、抗原性質(zhì)、佐劑的種類來制定免疫方案??刹捎萌棵庖叻?、微量免疫法或混合免疫法。  4.抗體產(chǎn)生階段:可分靜止期(約2天,血中尚無抗體);指數(shù)期(約4天左右,抗體迅速上升);穩(wěn)定期(約24周,抗體保持一個(gè)穩(wěn)定水平);下降期(約幾個(gè)月后,此時(shí)抗體緩慢下降)四個(gè)階段。 

(三)動(dòng)物采血法  動(dòng)物采血法有頸動(dòng)脈放血法、心臟采血法、靜脈多次采血法等。

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