小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子Delisa試劑盒酶免分析步驟:
1實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
1）.預(yù)*行編號(hào)，標(biāo)記標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置，*進(jìn)行雙孔檢測(cè)（每次實(shí)驗(yàn)都須做標(biāo)準(zhǔn)曲線）；
2）.使用前將所有試劑回升至室溫,取所需數(shù)量的微孔條，將多余板條用試劑盒提供的自封袋重新密封同時(shí)排除里面空氣，并立即放回2-8℃干燥保存。
2分析步驟
1）.在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入50?l各標(biāo)準(zhǔn)品溶液，在各樣品孔中加入50?l樣品溶液；
2）.在所有孔中加入50?l的嘔吐毒素酶標(biāo)記物溶液，輕微晃動(dòng)反應(yīng)板使之*混勻，室溫下（20-25℃）溫浴40min；
3）.甩干孔中液體，用洗滌工作液（250ul/孔）洗滌微孔板4-5次，zui后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以*除去孔中液體；
4）.洗滌程序完成后，立即用微量移液器在每個(gè)微孔中先加入50?l底物液A，再加 50?l底物液B，輕微晃動(dòng)使之混勻；
5）.室溫下（20-25℃）溫浴15min（若顏色較淺可適當(dāng)延長(zhǎng)至20min），每孔中加入50?l終止液，混勻，在450nm下檢測(cè)吸光度，結(jié)果在5min內(nèi)讀取。
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子Delisa試劑盒結(jié)果計(jì)算:
*使用快靈Log/Logit計(jì)算程序?qū)z測(cè)結(jié)果進(jìn)行計(jì)算，將檢測(cè)OD均值和標(biāo)準(zhǔn)品濃度輸入，即可自動(dòng)獲得檢測(cè)結(jié)果，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品種嘔吐毒素濃度。
其他參數(shù)：
1.本試劑盒檢測(cè)下限為 20ppb
2.B0 吸光度值應(yīng)大于 0.8，小于 0.8 認(rèn)為試劑已變質(zhì)不可用
3.試劑盒吸光度板內(nèi)誤差小于 8%，板間誤差小于 15%
5.用本說明書提供的樣本提取方法回收率為 95%±15%
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