人克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16) ELISA Kit代測
ELISA試劑盒的清洗操作注意事項
(1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
(2)實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
(3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
(4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
(5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
(6)洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
(7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
(8)加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
(9)按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
人克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16) ELISA Kit代測
elisa 小知識:
辣根過氧化物酶(HRP)是一種糖蛋白,每個分子含有一個氯化血紅素(protonhemin)區(qū)作輔基。酶的濃度和純度常以輔基的含量表示。氯化血紅素輔基的zui大吸收峰是403nm,HRP酶蛋白的zui大吸收峰是275nm,所以酶的濃度和純度計算式是(已知HRP的A(1cm 403nm 1%)=25,式中1%指HRP百分濃度為100ml含酶蛋白1g,即10mg/ml,所以,酶濃度以 mg/ml 計算是HRP的A(1cm 403nm mg/ml=2.5)HRP純度(RZ)=A403nm/A275nm純度RZ(Reinheit Zahl)值越大說明酶內(nèi)所含雜質(zhì)越少。高純度HRP的RZ值在3.0左右,zui高可達(dá)3.4。用于ELISA檢測的HRP的RZ值要求在3.0以上。
人克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16) ELISA Kit代測
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