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人神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒

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實(shí)驗(yàn)原理:

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。

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標(biāo)本的采集和保存
◎可用作ELISA的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清,血漿,各種積液),分泌物(如唾液)和排瀉物(如糞便,尿液)均可作為標(biāo)本以測(cè)定其中的抗原或抗體成分,一般使用血清。
n 標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)盡量避免溶血,因紅細(xì)胞破裂可釋放過氧化物酶活性物質(zhì)干擾立可讀方法的結(jié)果,可造成假陽性;長(zhǎng)菌的標(biāo)本同樣的道理易產(chǎn)生假陽性。
◎抗凝不*的標(biāo)本因纖維蛋白元的干擾而造成假陽性,建議盡量不用抗凝血尤其是用肝素抗凝劑。
◎標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過長(zhǎng)易導(dǎo)致血清IgG聚合,使間接法的試劑本底加深,一般血清置4℃冰箱5天內(nèi)完成測(cè)試。如需保存一周以上則要-20℃冰凍保存,融解時(shí)應(yīng)上下顛倒充分混勻,同時(shí)避免氣泡。
◎ELISA的靈敏度>1ng/ml水平上,標(biāo)本間的污染要盡量避免,尤其不應(yīng)與生化試驗(yàn)用同一管標(biāo)本.zui起碼應(yīng)先做免疫后做生化.
附:內(nèi)外干擾物質(zhì)的影響分析
          溶血     脂濁       RF        自身抗體     AFP        補(bǔ)體      肝素        EDTA
A    0.165    0.200      0.250      0.264        0.186     0.146     0.183       0.126
S    0.023    0.016      0.007      0.029        0. 010    0. 007    0.019       0.013
A對(duì)照0.151  0.195      0.195      0.195       0 .116     0.116     0.116      0.116
S    0.038    0.008      0. 008      0.008       0.018      0.018     0.018      0.018
P   > 0.05   > 0.05    < 0.01     < 0.01      < 0.01     < 0.01     <0.01   <0.01

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