駱駝脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加*40μL;
4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 所有孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
駱駝脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒
質(zhì)量控制(Quality Control,QC)
定性試驗(yàn):ELISA定性試驗(yàn)的臨床意義在于是否檢出病原體,與檢出量無關(guān),因此QC要保證試驗(yàn)的靈敏度和特異性。生化的質(zhì)控圖方法僅能觀察靈敏度而無法監(jiān)控特異性。
建議使用臨界值血清界定法:將試劑盒所設(shè)的陰陽性對照作為內(nèi)對照指示反應(yīng);另設(shè)臨界值、高值質(zhì)控血清,正常人血清作為外對照,與標(biāo)本同時(shí)檢測,臨界值S/C.O≥1,高值質(zhì)控血清S/C.O≥10,正常人血清A值在0.05~0.07之間。
◎陽性質(zhì)控血清失控(臨界值為靈敏度,高值為"HOOK"效應(yīng)監(jiān)控)應(yīng)重做陰性標(biāo)本;陰性對照失控應(yīng)重做陽性標(biāo)本。
◎以表格式記錄每塊板的外對照實(shí)驗(yàn)結(jié)果,作為QC資料存檔。
駱駝脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒
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