鹿紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)ELISA試劑盒

實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：

1.儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。

2. 洗液的配制：按1:30的比例配制洗液備用。

三．樣品收集、處理及保存

1）.細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

2）細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右，通過(guò)反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè)。

3）血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。

4）血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

5）體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

6.）組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。

樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

7）保存：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

鹿紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)ELISA試劑盒

評(píng)價(jià)方法
◎1）發(fā)質(zhì)控物進(jìn)行調(diào)查，這是目前國(guó)內(nèi)外常見(jiàn)的形式，采用定期發(fā)放質(zhì)控物至各實(shí)驗(yàn)室，各實(shí)驗(yàn)室在規(guī)定的日期進(jìn)行檢驗(yàn)，并將結(jié)果報(bào)至組織者（部、省臨檢中心）。組織者通過(guò)統(tǒng)計(jì)分析，再將評(píng)價(jià)結(jié)果寄回實(shí)驗(yàn)室，使其了解工作質(zhì)量，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，提高質(zhì)量。其缺點(diǎn)為由于各實(shí)驗(yàn)室吃小灶或互相打修改結(jié)果而達(dá)不到真正評(píng)價(jià)作用。
◎2）現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查，事先不通知，臨時(shí)派出人員到各實(shí)驗(yàn)室，規(guī)定采用常規(guī)方法，檢測(cè)一組標(biāo)本，進(jìn)行評(píng)價(jià)。這種方法可以解決實(shí)際問(wèn)題，進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)指導(dǎo)，組織者常因人力、物力的原因而不能經(jīng)常性進(jìn)行。

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