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谷胱系列還原型(GSH)測試盒_分光光度法

參  考  價:面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號50管/48樣

品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所在地上海市

更新時間:2022-07-26 10:10:46瀏覽次數(shù):503次

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品牌 紀寧生物 貨期 現(xiàn)貨供應(yīng)
有效期 6個月 用途 僅供科研實驗使用
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谷胱系列還原型(GSH)測試盒_分光光度法

測定方法:分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

注    意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義:

GSH是細胞內(nèi)主要的抗氧化巰基物質(zhì),在抗氧化、蛋白質(zhì)巰基保護和氨基酸跨膜運輸?shù)戎芯哂兄匾饔谩_€原型與氧化型比值(GSH/GSSG)是細胞氧化還原狀態(tài)的主要動態(tài)指標。因此,測定細胞內(nèi)GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能夠很好地反映細胞所處的氧化還原狀態(tài)。

測定原理:

DTNB與GSH反應(yīng)生成復(fù)合物,在412nm處有特征吸收峰;其吸光度與GSH含量成正比。


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自備儀器和用品:

可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。


試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。

試劑三:液體×1瓶,4℃避光保存。

谷胱系列還原型(GSH)測試盒_分光光度法

粗酶液提取:

1.組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心10min,取上清置冰上待測。

2.細菌、真菌:按照細胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

3.血清等液體:直接測定。

GSH測定操作:

1. 分光光度計預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長到412 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二置于25℃(一般物種)或者37℃(哺乳動物)水浴中保溫30min。

3. 空白管:取1mL玻璃比色皿,依次加入100μL蒸餾水,700μL試劑二,200μL試劑三,混勻靜置2min后測定412 nm吸光度A1。

4. 測定管:取1mL玻璃比色皿,依次加入100μL上清液,700μL試劑二,200μL試劑三,混勻靜置2min后測定412 nm吸光度A2。

注意:空白管只需要測定一次。



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