乙酰酯酶(AchE)測試盒_酯酶系列_分光光度法
測定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
注 意 ：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義：
AchE屬于Ser水解酶，廣泛存在于各種動物組織和血清中。AchE催化乙酰（Ach）水解，在神經(jīng)傳導(dǎo)調(diào)節(jié)中起重要作用。
乙酰酯酶(AchE)測試盒_酯酶系列_分光光度法
測定原理：
AchE催化Ach水解生成與二硫?qū)ο趸郊姿幔―TNB）作用生成5-巰基-硝基苯甲酸（TNB）；TNB在412nm處有吸收峰，通過測定412 nm吸光度增加速率，計算AchE活性。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制：
提取液：液體×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入2.6mL試劑一，充分震蕩溶解。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入2.6mL試劑一，充分震蕩溶解。
粗酶液提取：
1.組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進行冰浴勻漿，8000g 4℃離心10min，取上清液待測。
2.細菌、真菌：按照細胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。
3.血清等液體：直接測定。
測定操作：
1. 分光光度計預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到412 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二置于37℃水浴中預(yù)熱30min。
3. 取1mL玻璃比色皿，依次加入100μL上清液、800 μL試劑一、50μL試劑二和50 μL試劑三，迅速混勻，于412nm處測定3min內(nèi)吸光值變化，第10s吸光值記為A1，第190s吸光值記為A2?！鰽測定管=A2-A1。
環(huán)保在線