葡萄糖含量測試盒_糖代謝系列
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意 :正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
葡萄糖不僅是細胞能量代謝的主要底物,而且其代謝中間產(chǎn)物是生物合成的重要底物。植物可通過光合作用產(chǎn)生葡萄糖。就哺乳動物而言,葡萄糖不僅是大腦神經(jīng)系統(tǒng)、肌肉、脂肪組織等的唯-一能源,而且與還原性輔酶、乳糖和乳脂的合成密切相關(guān)。
葡萄糖含量測試盒_糖代謝系列
測定原理:
葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并產(chǎn)生過氧化氫;過氧化物酶催化過氧化氫氧化4-氨基安替-比林偶聯(lián)酚,生成有色化合物,在505 nm有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽和蒸餾水
試劑的組成和配制:
試劑一:0.5μmol/mL葡萄糖溶液10mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體 25ml×1瓶,4℃保存;
試劑三:液體 25ml×1瓶,4℃保存;(若出現(xiàn)結(jié)冰現(xiàn)象,可37℃水浴溶解后使用)
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1、組織的處理:按照組織質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL蒸餾水),研磨成勻漿,95℃水浴10分鐘(蓋緊,防止水分散失),冷卻后,8000g,25℃離心10min,取上清液備用。
2、細菌或細胞處理:收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):蒸餾水體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL蒸餾水),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3S,間隔10S,重復(fù)30次),95℃水浴10分鐘(蓋緊,防止水分散失),冷卻后,8000g,25℃離心10min,取上清液備用。