糖代謝系列_糖化酶(Glucoamylase)測試盒
測定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
注 意:正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
糖化酶,即葡萄糖淀-粉酶(EC3.2.1.3),又稱 γ-淀粉-酶,是一種外切型糖苷酶,它從淀粉的非還原性末端水解 α-1,4 糖苷鍵和 α-1,6 糖苷鍵,將淀粉*水解為葡萄糖,因此廣泛的應(yīng)用于酒精、白酒、抗生素、氨基酸、有機酸,甘油,淀粉糖等工業(yè)中,是我國重要的工業(yè)酶制劑之一。
糖代謝系列_糖化酶(Glucoamylase)測試盒
測定原理:
糖化酶水解可溶性淀粉生成葡萄糖,與 3,5-二硝基水楊酸生成紅棕色化合物,在 540nm 處有大光吸收,在一定范圍內(nèi)反應(yīng)液顏色深淺與葡萄糖的量成正比,可測定計算得糖化酶的活力。
自備實驗用品及儀器:
天平、低溫離心機、研缽、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、恒溫水浴鍋。
試劑組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。(若出現(xiàn)沉淀,可以 90℃加熱 5 分鐘溶解后使用)試劑二:液體 10mL×1 瓶,4℃避光保存。
酶液提?。?/p>
1. 組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g,加入 1mL 提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于 4℃,10000g 離心 10min,取上清置于冰上待測。
2. 細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)胞加入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時間 3min);然后 4℃,10000g 離心 10min,取上清置于冰上待測。
3. 培養(yǎng)液或其它液體:直接檢測。