氨基酸代謝系列_谷氨-酰胺合成酶(GS)測(cè)試盒
測(cè)定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣
注 意：正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義：
GS（EC 6.3.1.2）主要存在于植物中，是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一，催化銨離子和谷-氨酸合成谷氨-酰胺，不僅可以防止過(guò)多的銨離子對(duì)生物有毒性，而且谷氨-酰胺也是氨的主要儲(chǔ)存和運(yùn)輸形式。
氨基酸代謝系列_谷氨-酰胺合成酶(GS)測(cè)試盒
測(cè)定原理：
GS在ATP和Mg2+存在下，催化銨離子和谷-氨酸合成谷氨-酰胺；谷氨-酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ─谷氨酰基異羥肟酸，在酸性條件下與鐵形成的絡(luò)合物在540nm處有大吸收峰，可用分光光度計(jì)測(cè)定。
所需的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：10mL×1瓶，-20℃保存；臨用前37℃預(yù)熱20min，充分混勻，如有沉淀，靜置10min，取上清待用。
試劑二：10mL×1瓶，-20℃保存；臨用前37℃預(yù)熱20min，充分混勻，如有沉淀，靜置10min，取上清待用。
試劑三：粉劑×2瓶，-20℃保存。用時(shí)每瓶加入5mL蒸餾水充分溶解待用。
試劑四：15mL×1瓶，4℃保存。
樣本測(cè)定的準(zhǔn)備：
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備：
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
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