土壤亮-氨酸氨基肽酶(S-LAP)測(cè)試盒_土壤系列
測(cè)定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
注 意 :正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
S-LAP是一類(lèi)能水解肽鏈N-末端為亮-氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性變化與機(jī)體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。
土壤亮-氨酸氨基肽酶(S-LAP)測(cè)試盒_土壤系列
測(cè)定原理:
S-LAP分解L-亮氨酰對(duì)硝基苯胺生成對(duì)硝基苯胺,后者在405nm有大吸收峰,通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算S-LAP活性。
自備用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:液體65mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;
S-LAP測(cè)定步驟:
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至405nm,蒸餾水調(diào)零。
在試劑二瓶中加入30mL試劑一充分溶解(如較難溶解,可60℃水浴加熱約30min促進(jìn)溶解);用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
S-LAP活力單位的計(jì)算:
a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
單位的定義:每天每g土樣每天生成1 μmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
S-LAP(μmol/d /g 土樣)=ΔA×V反總÷(ε×d)×106÷W÷T=14.8×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,1.2×10-3 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;T:反應(yīng)時(shí)間,1h=1/24d; W:樣本質(zhì)量,0.2g。