Na+k+ ——ATP酶測試盒_氧化磷酸化系列
測定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣
注 意 ：正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
Ca++ Mg++-ATP酶廣泛分布于植物、動物、微生物和細胞中，可催化ATP水解生成ADP和無機磷。
測定原理：
根據(jù)Ca++ Mg++-ATP酶分解ATP生成ADP及無機磷，通過測定無機磷的量來確定ATP酶活性高低。
Na+k+ ——ATP酶測試盒_氧化磷酸化系列
需自備的儀器及用品:
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液： 液體50mL ×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 10mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體 5mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 5ml×1 瓶，4℃保存。
試劑四：粉劑×3 支，-20℃保存。用時每支加1mL蒸餾水，現(xiàn)用現(xiàn)配；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑五：液體 5mL×1 瓶，4℃保存。
試劑六：粉劑×1瓶，4℃保存。用時加入3mL蒸餾水， 4℃保存。
試劑七：粉劑×1瓶, 4℃保存。用時加入25mL蒸餾水，溶解后4℃保存一周。
試劑八：粉劑×1瓶, 4℃保存。用時加入25mL蒸餾水，溶解后4℃保存一周。
試劑九：液體25mL×1 瓶，室溫保存。
試劑十：10mmol/L 標準磷貯備液 10mL×1 瓶，4℃保存。
0.5μmol/mL 標準磷應(yīng)用液配制：將試劑十 20倍稀釋，即取 0.1mL試劑十加1.9mL蒸餾水充分混勻。
定磷劑的配制：按H2O: 試劑七:試劑八:試劑九=2:1:1:1 的比例配制，配好的定磷劑應(yīng)為淺。若無色則試劑失效，若是藍色則為磷污染，定磷劑現(xiàn)用現(xiàn)配。
注意：配試劑好用新的燒杯、玻棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
樣品酶液的制備：
1、細菌、細胞或組織樣品的制備：
細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、血清（漿）樣品：直接檢測。
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