氮代謝系列_硝酸還原酶(NR)測(cè)試盒
測(cè)定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣
注 意：正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義：
NR（ EC 1.7.1.3）廣泛存在于植物中，是植物硝態(tài)氮轉(zhuǎn)化為氨態(tài)氮的關(guān)鍵酶，也是誘導(dǎo)酶，對(duì)作物的產(chǎn)量和品質(zhì)有影響。
氮代謝系列_硝酸還原酶(NR)測(cè)試盒
測(cè)定原理：
NR催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，NO3ˉ +NADH+H＋→ NO2ˉ +NAD＋ +H 2 O；產(chǎn)生的亞硝酸鹽能夠在酸性條件下，與對(duì)–氨基苯磺酸及 α - 萘胺定量生成紅色偶氮化合物；生成的紅色偶氮化合物在 540 nm 有大吸收峰，可用分光光度法測(cè)定。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
誘導(dǎo)劑儲(chǔ)備液：液體50mL×1瓶，4℃保存。
提取液：液體60mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體10mL×1瓶，-20℃保存。
試劑二：液體5mL×1瓶，-20℃保存；
試劑三：液體6mL×1瓶，4℃保存（如出現(xiàn)結(jié)晶析出，60℃-90℃水浴溶解后使用）；
試劑四：液體6mL×1瓶，4℃保存。
試劑五：標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1mL，-20℃保存。
誘導(dǎo)劑應(yīng)用液的配制：用時(shí)將誘導(dǎo)劑儲(chǔ)備液稀釋10倍，即取10mL誘導(dǎo)劑儲(chǔ)備液加90mL蒸餾水，充分混勻。
0.1umol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液的配制：用時(shí)將試劑五稀釋100倍，即取 0.1ml試劑五加9.9mL蒸餾水，充分混勻。
樣本前處理：
動(dòng)植物組織樣品的前處理:
（1）取適量誘導(dǎo)劑于燒杯中，將新鮮標(biāo)本洗凈，濾紙吸干，放入誘導(dǎo)劑應(yīng)用液中（淹沒即可），浸泡2h，取出樣本，濾紙吸干。
（2）按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
注意：
1、 建議使用新鮮沒有冷凍過的樣本。
2、 一般不
要誘導(dǎo)處理，預(yù)測(cè)定結(jié)果沒有活性（A測(cè)定≤A對(duì)照管）則需要誘導(dǎo)處理。
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