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Roche、Sigma、GIBCO、Amresco、Fluka、Merck、Invitrogen、Difco、Serva、Whatman等試劑品牌,大家都在用,T4 RN連接酶價格也不貴,規(guī)格、包裝多樣。
中文名稱: T4 RN連接酶
英文名稱: T4 RN Ligse
分子量:43.6kD,單體
級別:BR
來源:含有T4噬菌體克隆基因63的大腸桿菌
濃度:10u/ul
T4 RN連接酶活性定義:是指在37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol 5'-[32P]-()12-18轉(zhuǎn)化為磷酸酶抗性形式所需的酶量
酶活性分析混合物:50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM TP, 10uM 5'-[32P]-()12-18(10uM 5'-末端)
保存液組分:20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT,0.1mM EDT,0.5mM ELUGENT變性劑和50%(v/v)甘油
10×反應緩沖液:500mM HEPES-NOH(PH8.0,25℃), 100mM MgCL2, 100mM DTT
抑制劑:金屬螯合劑、SH基團修飾試劑
失活:70℃加熱10分鐘
質(zhì)量控制:測試表明無內(nèi)切和外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染
備注:反應體系中TP的濃度取決于連接反應的類型,推選的BS反應濃度是0.1mg/ml
性狀:重組酶,催化TP依賴的分子內(nèi)和分子間磷酸二酯鍵連接(5'-磷酸基團和3'-羥基末端),底物分子為多聚核苷酸、寡核苷酸、ssRN和ssDN,分子之間的zui小的連接底物是核苷3',5'-二磷酸,而分子內(nèi)連接的zui小底物是8個堿基的寡核苷酸。配套提供反應緩沖液、TP和BS溶液。催化3'→5'磷酸二酯鍵的形成,使核苷酸的5'-磷酸末端和5'-羥基末端連接。作用底物包括單鏈RN、DN及二核苷焦磷酸。隨酶提供10X 反應緩沖液
用途:生化研究。連接RN和RN ;RN3'-末端標記胞嘧啶3',5'-雙[-32P]磷酸; tRN的特異性修飾;合成寡核苷酸的環(huán)化;寡聚脫氧核糖核苷酸與單鏈cDN連接,用于5'RCE(快速擴增cDN末端)分析
保存: -20°C
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