P450系列_紅-霉素N脫甲基酶(ERND)測(cè)試盒
測(cè)定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣
注 意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
細(xì)胞色素P450酶是一組主要存在于肝臟的酶系，在外源物質(zhì)代謝中，尤其是藥物和毒物的代謝，具有重要作用。ERND在P450酶系中相當(dāng)于CYP2B亞型，與藥物代謝的去甲基化密切相關(guān)。CYP2B具有催化底物形成非活性易于排泄的代謝產(chǎn)物而具有解毒作用，也可使某些藥物經(jīng)CYP2B代謝活化。
P450系列_紅-霉素N脫甲基酶(ERND)測(cè)試盒
測(cè)定原理：
ERND催化紅-霉素釋放甲醛，通過Nash比色測(cè)定甲醛含量，即可計(jì)算出ERND活性。
自備儀器和用品：
普通離心機(jī)，超速離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水和冰。
試劑組成和配置：
試劑一：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加100mL蒸餾水溶解。
試劑二：液體×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1管，4℃保存。臨用前加1mL蒸餾水，充分溶解。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加0.5mL蒸餾水，充分溶解。
試劑五：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前，加蒸餾水4.5mL充分溶解。
試劑六：液體×1瓶，4℃保存。
試劑七：液體×1瓶，4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)液：液體×1瓶，-20℃保存。臨用前取1.5mL EP 管，加入10μl標(biāo)準(zhǔn)液，加990μl蒸餾水，混勻即為0.05 mmol/L標(biāo)準(zhǔn)甲醛-溶液，4℃保存。
粗酶液提?。?br/>
1、除去細(xì)胞核，線粒體等大分子物質(zhì)：稱約0.5g組織，加入1mL試劑一，冰上充分研磨，10 000g 4℃離心30min，取上清液，轉(zhuǎn)入超速離心管中。
2、粗制微粒體：100 000g，4℃，離心60min，棄上清液。
3、除血紅蛋白等雜質(zhì)：向步驟2的沉淀中加1mL試劑一，蓋緊后充分震蕩溶解，100 000g離心30min，棄上清液。
4、終微粒體：向步驟3的沉淀中加試劑二0.5mL，充分震蕩溶解，即粗酶液，待測(cè)。該待測(cè)液需當(dāng)天使用。
環(huán)保在線