P450系列_氨基-比林N去甲基化酶(AND)測(cè)試盒
測(cè)定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣
注 意 ：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
細(xì)胞色素P450酶是一組在外源物質(zhì)代謝中，尤其是藥物和毒物，具有重要作用的酶系。AND作為P450酶系的重要一員，相當(dāng)于CYP3A4亞型，與藥物的去甲基化反應(yīng)密切相關(guān)。
P450系列_氨基-比林N去甲基化酶(AND)測(cè)試盒
測(cè)定原理：
AND催化氨基-比林釋放甲醛，通過(guò)Nash比色法測(cè)定甲醛含量，即可計(jì)算出AND活性。
自備儀器和用品：
普通離心機(jī)，超速離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水、無(wú)水乙醇和冰。
試劑組成和配制：
試劑一：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加100mL蒸餾水充分溶解。
試劑二：液體×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1管，4℃避光保存。臨用前加入1mL無(wú)水乙醇，充分溶解。
試劑四：粉劑×1管，4℃保存。臨用前加入0.5mL蒸餾水，充分溶解。
試劑五：粉劑×1瓶，室溫保存。臨用前加蒸餾水4mL充分溶解。
試劑六：液體×1瓶，室溫保存。
試劑七：液體×1瓶，4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)液：液體×1瓶，-20℃保存。臨用前取1.5mL EP 管，加入10μl標(biāo)準(zhǔn)液，加990μl蒸餾水，混勻即為0.05 mmol/L標(biāo)準(zhǔn)甲醛-溶液，4℃保存。
粗酶液提?。?br/>
1、除去細(xì)胞核，線粒體等大分子物質(zhì)：稱約0.5g組織，加入1 mL試劑一，冰上充分研磨，10 000g 4℃離心30min，取上清液轉(zhuǎn)入超速離心管。
2、粗制微粒體：4℃，100 000g，離心60min，棄上清液。
3、除血紅蛋白等雜質(zhì)：向步驟2的沉淀中加1mL試劑一，蓋緊后充分震蕩溶解，100 000g離心30min，棄上清液。
4、終微粒體：向步驟3的沉淀中加試劑二0.5 mL，蓋緊后充分震蕩溶解，即粗酶液，待測(cè)。該待測(cè)液需當(dāng)天使用。
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