微量法_總抗氧化能力(FRAP法)測(cè)試盒
測(cè)定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
注 意:正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
微量法_總抗氧化能力(FRAP法)測(cè)試盒
研究意義:
測(cè)定對(duì)象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測(cè)血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細(xì)胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。
測(cè)定原理:
在酸性環(huán)境下,抗氧化物質(zhì)還原 Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)產(chǎn)生藍(lán)色的 Fe2+-TPTZ 的能力反映了總抗氧化能力。
自備實(shí)驗(yàn)用品:
恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96 孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體 120mL×1 瓶,使用前預(yù)冷。
試劑一:液體 20 mL×1 瓶,避光保存。
試劑二:液體 2 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體 2 mL×1 瓶,避光保存。
混合液(現(xiàn)配現(xiàn)用):將試劑一、試劑二、試劑三按 10:1:1 的比例混合,使用前 37℃預(yù)溫。
樣品的制備:
(1)血清、血漿、唾液或尿液等液體樣品
血漿(制備時(shí)可以使用肝素或檸檬酸鈉抗凝,不宜使用 EDTA 抗凝)4℃,5000rpm 離心
10min,取上清待測(cè)。血清、唾液或尿液樣品直接用于測(cè)定,也可以-80℃凍存(不宜超過(guò)
30d)后再測(cè)定。
(2) 組織樣品
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后 10000g,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
(3) 細(xì)胞樣品
按照細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)胞加入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎(功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);10000g,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。