總巰基(-SH)測試盒_氧化與抗氧化系列
測定方法：分光光度法
產品規(guī)格：50管/24樣
注 意 ：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
總巰基(-SH)測試盒_氧化與抗氧化系列
測定意義：
生物體內巰基主要包括GSH巰基和蛋白質巰基。前者不僅能夠修復氧化損傷的蛋白質，而且參與活性氧清除，后者對于維持蛋白質構象具有重要作用。通過測定總巰基含量和GSH含量，能夠間接測定蛋白質巰基含量。
測定原理：
巰基基團與5,5’- 二硫代-雙-硝基苯甲酸（DTNB）反應，生成化合物，在412nm處有大吸收峰。
自備實驗用品：
天平、研缽、可見分光光度計、恒溫水浴鍋、1mL玻璃比色皿、乙醇和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體40 mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體2 mL×1瓶，4℃避光保存。
樣品的制備：
1.按照組織質量（g）：水體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進行冰浴勻漿，然后8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2.血清，培養(yǎng)液：稀釋5倍后測定，可取0.1mL樣本，加入0.4mL蒸餾水，混勻，置冰上待測。
計算公式：
總巰基標準曲線：y =3.6222 x- 0.0037，R2 = 1，x為標品濃度，單位μmol/mL， y為吸光度ΔA。
1. 組織：
（1）按樣本重量計算
總巰基含量（μmol/g 鮮重）=（ΔA+0.0037）÷3.6222 ×V樣總÷W
=0.276×（ΔA+0.0037）÷W
（2）按樣本蛋白濃度計算
總巰基含量（μmol/mg prot）=（ΔA+0.0037）÷3.6222×V樣總÷Cpr
=0.276×（ΔA+0.0037）÷Cpr
2. 血清、培養(yǎng)液：
總巰基含量（μmol/L）=（ΔA+0.0037）÷3.6222 ×5×103
=1380×（ΔA+0.0037）
V樣總：加入提取液體積，1mL；W：樣品質量，g ；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；5：血清，培養(yǎng)液等液體樣本稀釋倍數；103 ：1mmol/L=103μmol/ L
環(huán)保在線