(GSH)S-轉(zhuǎn)移酶GST測(cè)試盒 _氧化與抗氧化
測(cè)定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
注 意：正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
(GSH)S-轉(zhuǎn)移酶GST測(cè)試盒 _氧化與抗氧化
測(cè)定意義：
GST 是一種具有多種生理功能的蛋白質(zhì)家族，主要存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。GST 是體內(nèi)解毒酶系統(tǒng)的重要組成部分，主要催化各種化學(xué)物質(zhì)及其代謝產(chǎn)物與 GSH 的巰基共價(jià)結(jié)合，使親電化合物變?yōu)橛H水物質(zhì)，易于從膽汁或尿液中排泄，達(dá)到將體內(nèi)各種潛在或具備毒性的物質(zhì)降解并排出體外的目的。因此，GST 在保護(hù)細(xì)胞免受親電子化合物的損傷中發(fā)揮著重要的生物學(xué)功能。此外，因?yàn)?GST 具有 GSH-Px 活性，亦稱為 non-Se GSH-Px，具有修復(fù)氧化破壞的大分子如 DNA、蛋白質(zhì)等的功能。注意，GST 催化的反應(yīng)減少 GSH 含量，但是不增加GSSG 含量。
測(cè)定原理：
GST 催化 GSH 與 CDNB 結(jié)合，其結(jié)合產(chǎn)物的光吸收峰波長(zhǎng)為 340nm；通過(guò)測(cè)定 340nm 波長(zhǎng)處吸光度上升速率，即可計(jì)算出 GST 活性。
自備儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、1mL 石英比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配置：
試劑一：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體 45mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加 5 mL 蒸餾水溶解。
粗酶液提?。?br/>
1.組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿。8000g，4℃離心 10min，取上清置冰上待測(cè)。
2.細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：試劑一體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)胞加入 1mL 試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時(shí)間 3min）；然后 8000g，4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測(cè)。
3.血清等液體：直接測(cè)定。
測(cè)定操作：
1.分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 340 nm，用蒸餾水調(diào)零。
2.試劑三放在 25℃（一般物種）或者 37℃（哺乳動(dòng)物）保溫。
3.測(cè)定管：取 1mL 石英比色皿，加入 100μL 上清液，900μL 試劑二和 100μL 試劑三，迅速混勻后于 340nm 測(cè)定吸光度變化，記錄 10 s 和 310 s 吸光度為 A1 和 A2。
環(huán)保在線