脂質(zhì)過氧化物(LPO)測試盒_分光光度法
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意:正式測定前務(wù)必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
脂質(zhì)過氧化是動植物體內(nèi)活性氧(ROS)氧化生物膜的過程,脂質(zhì)過氧化物(LPO)是脂質(zhì)過氧化過程的產(chǎn)物,即 ROS 與生物膜的磷脂、酶和膜受體相關(guān)的多不飽和脂肪酸的側(cè)鏈及核酸等大分子物質(zhì)起脂質(zhì)過氧化反應(yīng)形成 LPO,使細胞膜的流動性和通透性發(fā)生改變,終導致細胞結(jié)構(gòu)和功能的改變。因此,LPO 常被作為機體氧化應(yīng)激的一種指標,與某些疾病的病理過程,如腫瘤、化學中毒、感染、炎 癥、自身免疫疾病、動脈粥樣硬化(AS)及心腦血管疾病,以及衰老等生理過程密切相關(guān)。
脂質(zhì)過氧化物(LPO)測試盒_分光光度法
測定原理:
LPO 在酸性條件下加熱,產(chǎn)生小分子終產(chǎn)物 MDA,MDA 與硫代(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在 535nm 有大吸收峰。
需自備的儀器和用品:
分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配置:
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 48mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 18mL×1 瓶,4℃保存。
注意事項:
臨用前注意試劑二是否*溶解,如未溶解,可以 70℃-90℃加熱,并振蕩以促進溶解。
LPO 提取:
1、細菌、細胞或組織樣品的制備:
細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。