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ELISA試劑盒板的制造流程

閱讀:370發(fā)布時間:2015-1-18

     關(guān)于ELISA試劑盒實驗相信各位老師都不陌生,ELISA試劑盒實驗一般包含兩個或以上的孵育步驟,中間以洗滌隔開。ELISA試劑盒通常在96孔板中開展,其上包被了結(jié)合抗原或抗體。

     在封閉步驟后,包被后的平板首先與一抗或抗原孵育。隨后通過一些洗滌步驟去除未結(jié)合(低親和力)的抗原-抗體復(fù)合物。接著,平板與二抗孵育。這種帶有酶的抗體與高親和力的抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。之后,又是一輪洗滌。

     zui后是添加底物并檢測信號。是比包被體積更高。太少的洗滌液會讓一部分分析表面洗滌不到,從而明顯增加背景。所有反應(yīng)孔的洗滌量必須相同。ELISA試劑盒板的制造商通常會在試劑盒的使用手冊中列出包被量。行業(yè)中通常使用的包被量是200 μl。如果你的試劑盒也是這樣,那么制造商可能會建議使用300 μl洗滌液進(jìn)行洗滌,以便清潔整個反應(yīng)孔的壁。

    一般來說,洗滌量越高,則孵育步驟殘留的抗體或抗原量就越少。通常的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復(fù)洗滌三次。不過,一般而言,制造商包被平板需要的洗滌次數(shù)比用戶包被的平板要少。對于用戶包被ELISA試劑盒板,必須優(yōu)化洗滌次數(shù)。


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