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技術(shù)文章

ELISA試劑盒的反應(yīng)中抗原過剩

閱讀：349發(fā)布時(shí)間：2016-10-18

  ELISA試劑盒標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。ELISA試劑盒這種現(xiàn)象被稱為鉤狀效應(yīng)，因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)曲線到達(dá)高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí)，反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測(cè)定標(biāo)本中含量可異常增髙的物質(zhì)時(shí),應(yīng)注意可測(cè)范圍的zui高值。用髙親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。
  ELISA試劑盒雙抗體夾心法適用于測(cè)定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原，伹不適用于測(cè)定半抗原及小分子單價(jià)抗，因其不能形成兩位點(diǎn)夾心。

注：標(biāo)本必須為液體，不含沉淀。

保存方法：
1．ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。 3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。


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