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ELISA試劑盒工作原理分析及洗板方法

閱讀：408發(fā)布時(shí)間：2017-3-3

ELISA試劑盒使用定性夾心免疫檢查技能，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是我國型HEV毒株中心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。
ELISA檢查試劑盒將樣品或規(guī)范品參加孔中并孵育，假如其間存在HEV IgM抗體，這些抗體就會(huì)與HEV 的多肽抗原，并固定在上面，洗板除掉其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。

然后參加羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶物，經(jīng)第2次孵育后，酶物就會(huì)與*次孵育上的HEV IgM抗體相，ELISA試劑盒洗板除掉未的酶物，參加TMB底物溶液，在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)作酶-底物反響，ELISA檢查試劑盒只有那些富含HEV IgM抗體和酶物所構(gòu)成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)作色彩改變，參加硫酸溶液停止酶和底物間的反響，ELISA試劑盒并在波長: 450nm處丈量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測(cè)驗(yàn)規(guī)范, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽性。

ELISA檢查試劑盒洗板辦法有以下兩點(diǎn)。
手工洗板辦法：吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在試驗(yàn)臺(tái)上襯托幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾回；將引薦的洗刷緩沖液zui少0.3ml寫入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘，根據(jù)需要，重復(fù)此進(jìn)程數(shù)次。
主動(dòng)洗板：假如有主動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式試驗(yàn)進(jìn)程中。待檢樣本：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、安排勻漿、心房水標(biāo)本等。


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