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ELISA試劑盒經(jīng)過*個保溫孵育期實(shí)驗(yàn)步驟

閱讀：258發(fā)布時間：2014-12-10

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    該ELISA試劑盒的設(shè)計(jì)是基于運(yùn)用兩個GLP-1特異性抗體與兩個位點(diǎn)結(jié)合的“雙位點(diǎn)夾心”技術(shù)。將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品、和待測樣品加入鏈霉親和素包被的微孔板中。隨后，將*偶聯(lián)的GLP-1特異抗體和HRP標(biāo)記的GLP-1特異抗體混合物添加到各個孔中。形成了“鏈霉親和素-*抗體- GLP-1（7-36）/（9-36）-HRP標(biāo)記抗體”的“雙位點(diǎn)夾心”結(jié)構(gòu)，ELISA試劑盒該復(fù)合體被微孔板的內(nèi)壁吸附住。游離的HRP標(biāo)記抗體和緩沖基質(zhì)則在洗滌過程中被沖走。微孔板加入過氧化物酶基質(zhì)并經(jīng)過一段時間的反應(yīng)后，然后用酶標(biāo)儀測量吸光度。微孔板內(nèi)壁的免疫復(fù)合體與GLP-1（7-36）/（9-36）的連接酶活性與樣本中的總GLP-1數(shù)量成正比。

酶免ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟：

1.將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和病人樣本添加到微孔中。

2.在各孔中添加100?L抗體混合物。

3.在2-8度的室溫下，靜置培養(yǎng)20-24小時。

4.用洗滌緩沖液稀釋液洗凈條帶。

5.在各孔中添加200 ?L的TMB基質(zhì)。

6.室溫下靜置20分鐘。

7.添加50 ?L終止液。

8.讀取吸光度。

    ELISA試劑盒是專門用來定量檢測血漿樣本中的胰高血糖素樣肽的總濃度。哺乳動物的GLP-1肽鏈的基本氨基酸序列*相同，如：小鼠、大鼠、豬、狗、猴、人等。該ELISA試劑盒僅適用于科學(xué)研究。


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