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兔腫瘤組織巨噬細胞分離液

閱讀:111發(fā)布時間:2016-01-18

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實驗方法

注:無血清培養(yǎng)基中不含任何動物成分,為得到更佳培養(yǎng)效果可添加 10%自體血漿或2-8% 經篩選的胎牛血清。*培養(yǎng)基中含 2-20%胎牛血清(血清具體含量由所培養(yǎng)的目的細胞而定)。由于每種細胞的貼壁時間存在差異可將所得細胞分開已達簡單的純化目的,此法成?本相對較低。如需獲得高純度目的細胞則需在使用分離液后選用免疫磁珠陽性或陰性分選。
兔腫瘤組織巨噬細胞分離液【注意事項】全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在 20±2的條件下進行。為獲得的實驗結果,zui 好在取樣 2h 內進行實驗,樣品存放時間越長,細胞分離效果越差。樣品放置超過 6h 后 分離效果更差甚至不能達到分離目的。?本實驗不要使用高聚合材質(如聚苯乙烯)的塑料制品,應使用無靜電、低靜電離 心管及未經堿處理過后的玻璃制品,因為靜電作用將導致細胞貼壁、堿處理的玻璃表面 會變成毛面,影響細胞分離效果。吸取過多的乳白色細胞層及分離液層會導致分離液交界處的粒細胞被吸出從而使混雜粒細胞數(shù)量增加。分離液用量大于組織單細胞懸液樣本時,分離效果更佳。?如實驗后細胞得率或活性過低,請以尋求幫助,具體詳 見下方生產企業(yè)信息。?
兔腫瘤組織巨噬細胞分離液【儲存條件及有效期】18-25保存,有效期 2 年。本品易感染細菌,需無菌條件操作。無菌條件下操作,啟封后置常溫保存。如 4保存,本分離液易出現(xiàn)白色結晶,影響分離效果。
【參考值(參考范圍)】本實驗巨噬細胞提取率大于 80%表為成年人外周血中各種細胞的數(shù)量及比例,用戶可適當進行參考。
【相關實驗技術方案】組織單細胞懸液制備技術。?所獲得巨噬細胞的培養(yǎng)技術。所獲得巨噬細胞的核酸提取技術所獲得巨噬細胞的鑒定方法 A.流式細胞技術 B.免疫組化技術 C.原位雜交技注:上述技術方案詳情請登陸本公司:搜索細胞分離、純化、擴增、鑒定及生物治療技術手冊,并在說明書項目欄下下載使用。
兔腫瘤組織巨噬細胞分離液【可能存在的問題及解決方法】由于血液粘度、細胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示:本分離液分離細胞的原理為密度梯度離心,其密度與溫度、大氣壓等密切相關。不同地 區(qū)客戶可根據當?shù)厍闆r對離心條件進行適當調整。建議對離心條件進行調整時,恒定離 心時間,對離心轉速進行調整。本分離液依照標準,全部使用藥用級原料,性能指標與國產同類產品略有不同,可 能出現(xiàn)紅細胞沉降不*的情況,可以適當加大離心轉速。注:在對離心條件進行調整時,離心轉速的加減以 50-100g 為基數(shù),直至達到分離效果,離心力zui小不得于 400g,zui大不得大于 1200g。離心時間以 20-30min 為準

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