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ELISA試劑盒法測定尿微量白蛋白研究

閱讀:469發(fā)布時間:2014-12-5

    目前,已出現(xiàn)多種檢測尿中微量白蛋白的方法,如化學發(fā)光法、放射免疫法、試條半定量法、免疫比濁法等。因此,本文主要探討ELISA試劑盒法檢測尿微量白蛋白的優(yōu)缺點。化學發(fā)光法雖具有高靈敏度、高準確度、高精密度、寬線性、反應快速,ELISA試劑盒影響因素少,結果準確等優(yōu)點,但化學發(fā)光法的缺點是儀器、試劑成本高,給患者帶來的經濟負擔相對較重。

在處理和保存方面要考慮以下幾個方面:
    (1)要注意避免出現(xiàn)嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標記酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應顯色。
    (2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產生分解作用;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產生非特異性干擾。
    (3)血清標本如是以無菌操作分離,ELISA試劑盒則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70℃以下。
    (4)冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復凍融。標本的反復凍融所產生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產生破壞作用,從而引起假陰性結果。此外,凍融標本的混勻亦應注意,不要進行劇烈振蕩,反復顛倒混勻即可。
    (5)標本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所致的混濁或絮狀物時,應離心沉淀后取上清檢測。
至今我們擁有了一支由銷售、技術服務、化學市等人員構成的ELISA試劑盒精英團隊,隨時為客戶提供zui的服務!近年來許多研究表明尿微量白蛋白不僅是糖尿病腎病的預測指標,也是心血管疾病的獨立危險因素[7],所以檢測尿微量白蛋白有重要的臨床價值。本文分別用ELISA試劑盒法和化學發(fā)光法測定尿微量白蛋白濃度,對其結果進行比較,并比較其優(yōu)缺點,從而評價ELISA試劑盒法的臨床適用性。
    微量白蛋白尿的臨床應用廣泛,微量白蛋白尿是反映腎臟疾病和損傷的一個非常靈敏的指標,在預示糖尿病、腎病方面已使用多年。近年有資料顯示,微量白蛋白尿也是非糖尿病患者心血管疾病發(fā)病的一個危險因子,受到廣泛重視。
 


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