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ELISA試劑盒使測讀結(jié)果更穩(wěn)定

閱讀:158發(fā)布時間:2015-1-23

    本實驗zui終需要酶催化底物顯色反應(yīng)來完成,在*時間終止反應(yīng)是ELISA試劑盒實驗成功的重要因素。在HRP-TMB酶反應(yīng)系統(tǒng)中,當(dāng)zui高濃度標(biāo)準品顏色不再變深,倒數(shù)2-3個濃度標(biāo)準品顏色開始有淺藍色時,便需要終止反應(yīng)。“也可以根據(jù)zui高濃度標(biāo)準品孔在620nm的OD值來決定,OD620=0.9-0.95之間時即可終止"。
ELISA試劑盒酶標(biāo)儀讀數(shù)的時候必須選用雙波長是有什么原因呢?
因為:
 1. 在使用酶標(biāo)儀之前務(wù)必預(yù)熱10-15min,
 2. ELISA試劑盒實驗采用雙波長測定吸光度,可以排除單波長檢測時的測定干擾。
    一般采用zui大波長作為參照波長,在參照波長下,檢測物的吸光值zui小,檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收;ELISA試劑盒因此,雙波長測定,可zui大限度的消除指紋、ELISA試劑盒雜質(zhì)及不透光的物質(zhì)對酶標(biāo)儀讀數(shù)帶來的誤差,以保證實驗數(shù)據(jù)的準確度。
   


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