ELISA試劑盒目視法簡捷清楚，但頗具主觀性。在條件許可下，應該用比色計測定吸光值，這么可以得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標本(sample，S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值，然后進行計算。計算辦法有多種，大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。a．陽性判定值陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數(shù)，以此作為區(qū)分效果陽性或陰性的標準。用此法區(qū)分效果懇求試驗條件非常安穩(wěn)，試劑的制備有必要標準化，陽性和陰性的對照品應符合一定的標準，須配用精密的儀器，并嚴厲按規(guī)矩操作。陽性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中經(jīng)過對許多標本的試驗查看而得到的。現(xiàn)舉某種查看HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿，陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml.每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。
在前期的間接法ELISA試劑盒中，有些作者定出S/N為陽性標準，現(xiàn)多為各種測定所沿襲。實際上每一測定系統(tǒng)應該用試驗求出各自的S/N的閾值。更應留心的是，N所代表的陰性對照是不含受檢物質的人血清。洗刷的辦法除某些ELISA儀器配有特其他自動洗刷儀外，手工操作有浸泡式和流水沖刷式兩種，進程如下：
(1)浸泡式 a.吸干或甩干孔內(nèi)反應液；b.用洗刷液過洗一遍(將洗刷液注滿板孔后，即甩去)；c.浸泡，即將洗刷液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖晃，浸泡時刻不可隨意縮短；d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干；e.重復操作c和d，洗刷3-4次(或按說明規(guī)矩)。在間接法中如本底較高，可增加洗刷次數(shù)或延伸浸泡時刻。
微量滴定。洗刷液多為含非離子型洗刷劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質的聯(lián)絡是疏水性的，非離子型洗刷劑既含疏水基團，也含親水基團，其疏水基團與蛋白質的疏水基ELISA試劑盒團借疏水鍵聯(lián)絡，然后削弱蛋白質與固相載體的聯(lián)絡，并借助于親水基團和水分子的聯(lián)絡效果，使蛋白質回復到水溶液狀況，然后脫離固相載體。洗刷液中的非離子型洗刷劑一般是吐溫20，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高于0.2%時，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。
(2)流水沖刷式流水沖刷法開端用于小珠載體的洗刷，洗刷液僅為蒸餾水乃至可用自來水。洗刷時附接一格外設備，使小珠在流水沖擊下不斷地翻滾淋洗，持續(xù)沖刷2分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖刷式則比方淋浴，其洗刷效果更為*，且也簡潔、迅速。已有試驗標明，流水沖刷式相同也適用于微量滴定板的洗刷。洗刷時設法加大水流量或加大水ELISA試劑盒壓，讓水流沖擊板孔外表，洗刷效果更佳。本月公司全場7.5折優(yōu)惠，ELISA試劑盒本司供應來樣查看效力（免費），客戶只需把您的標本寄過來，我們保證出效果。含稅含運費，等待咨詢。
ELISA試劑盒試驗中有必要加測陰性對照。陰性對照的構成應為不含受檢物的正常血清或類似物(見3.6)。在用肉眼區(qū)分效果時，更宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的指標。目視法簡捷清楚，但頗具主觀性。在條件許可下，應該用比色計測定吸光值，這么可以得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標本(sample，S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值，然后進行計算。計算辦法有多種，大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。a．陽性判定值陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數(shù)，以此作為區(qū)分效果陽性或陰性的標準。用此法區(qū)分效果懇求試驗條件非常安穩(wěn)，試劑的制備有必要標準化，陽性和陰性的對照品應符合一定的標準，須配用精密的儀器，并嚴厲按規(guī)矩操作。陽性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中經(jīng)過對許多標本的試驗查看而得到的?，F(xiàn)舉某種查看HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿，陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml.每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后，先計算陰性對照A值的平均數(shù)(NCX)和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX)，兩個平均數(shù)的差(P-N)有必要大于一個特定的數(shù)值(例0.400)，試驗才有用。3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX，如其中之一超出此規(guī)劃，則棄去，算了另兩個陰性對照從頭計算NCX；如有兩個陰性對照A值超出以上規(guī)劃，則該次試驗無效。陽性判定值按下式計算：陽性判定值=NCX+0.05 標本A值＞陽性判定值的為陽性，小于陽性判定值的為陰性。應留心的是，式中0.05為該試劑盒的常數(shù)，只適合于該特定條件下，而不是對各種試劑均可通用。根據(jù)以上敘說可以看出，在這種辦法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質控效果，試劑蛻變和操作不當均會發(fā)作"試驗無效"的后果。b.標本/陰性對照比值在試驗條件(包括試劑)較難保證安穩(wěn)的情況下，這種區(qū)分法較為適合。在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值后，計算S/N值。也有寫作P/N的，這兒的P不代表陽性(positive)，而是病人(patient)的縮寫，不應誤解。為避免稠濁，更宜用S/N表明。在前期的間接法ELISA試劑盒中，有些作者定出S/N為陽性標準，現(xiàn)多為各種測定所沿襲。實際上每一測定系統(tǒng)應該用試驗求出各自的S/N的閾值。更應留心的是，N所代表的陰性對照是不含受檢物質的人血清。洗刷的辦法除某些ELISA儀器配有特其他自動洗刷儀外，手工操作有浸泡式和流水沖刷式兩種，進程如下：
(1)浸泡式 a.吸干或甩干孔內(nèi)反應液；b.用洗刷液過洗一遍(將洗刷液注滿板孔后，即甩去)；c.浸泡，即將洗刷液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖晃，浸泡時刻不可隨意縮短；d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干；e.重復操作c和d，洗刷3-4次(或按說明規(guī)矩)。在間接法中如本底較高，可增加洗刷次數(shù)或延伸浸泡時刻。
微量滴定板多選用浸泡式洗刷法。洗刷液多為含非離子型洗刷劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質的聯(lián)絡是疏水性的，非離子型洗刷劑既含疏水基團，也含親水基團，其疏水基團與蛋白質的疏水基團借疏水鍵聯(lián)絡，然后削弱蛋白質與固相載體的聯(lián)絡，并借助于親水基團和水分子的聯(lián)絡效果，使蛋白質回復到水溶液狀況，然后脫離固相載體。洗刷液中的非離子型洗刷劑一般是吐溫20，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高于0.2%時，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。
(2)流水沖刷式流水沖刷法開端用于小珠載體的洗刷，洗刷液僅為蒸餾水乃至可用自來水。洗刷時附接一格外設備，使小珠在流水沖擊下不斷地翻滾淋洗，持續(xù)沖刷2分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖刷式則比方淋浴，其洗刷效果更為*，且也簡潔、迅速。已有試驗標明，流水沖刷式相同也適用于微量滴定板的洗刷。洗刷時設法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔外表，洗刷效果更佳。本月公司全場7.5折優(yōu)惠，ELISA試劑盒本司供應來樣查看效力（免費），客戶只需把您的標本寄過來，我們保證出效果。含稅含運費，等待咨詢。
