在實際工作當中有很多要素影響著免疫組化的成果，包括技能人員是不是嫻熟掌握悉數(shù)試驗的操作程序、抗體的特異性、辦法的靈敏性、標本的固定、安排的處理、是不是進行抗原批改、批改液的PH值等等要素。為了讓每個試驗室能夠繼續(xù)穩(wěn)定地完成牢靠的試驗染色成果，應當將免疫組化染色技能中的悉數(shù)流程納入標準化。雖然免疫組化在很多試驗室中已慣例開展，但它是一個多過程、多要素決定的一種試驗辦法，由于各試驗室選用的批改辦法、染色辦法、試劑廠家、抗體克隆號、檢查體系等有所不一樣，染色成果會呈現(xiàn)較大差異，適當部分的試驗室對免疫組化標準化的知道尚欠足夠注重, 致使不良的染色成果對病理確診致使誤導，因而免疫組化染色成果的牢靠性受到了*的重視。
一、 免疫組化成功的要素
病理科醫(yī)師要有適當?shù)拿庖呓M化確診常識和免疫組化技能經(jīng)驗，要明白知道免疫組化技能是一門試驗性、技能性十分強的技能，要多了解多種抗體在安排中的表達情況，以及影響免疫組化成果的各種要素，只要進步醫(yī)師的免疫組化確診水平才干防止過錯的判別，才干確保免疫組化確診的準確性。病理技能人員是免疫組化試驗成功的關鍵要素，操作人員要有豐厚的免疫組化的理論常識及嫻熟的免疫組化染色技能，十分明白每一個過程的使用原理，使試驗成果更具牢靠性。牢靠的試驗試劑和試驗辦法是每個試驗室的*條件。由于試驗辦法多種多樣，抗體的品種繁多，每個試驗室都應當確保高質量價的試劑，并摸索出的試驗條件。優(yōu)異的免疫組化取決于有用的抗原批改、靈敏的檢查體系、適宜的試驗質控對照及嫻熟和有責任心的技能人員。
二、免疫組化染色前處理技能操作標準
1．選材：抱負的選材厚度是0.2cm～0.3cm，大多數(shù)試驗室都以為安排在加熱抗原批改過程中構成脫片的首要原因是選材過厚或脫水浸蠟處理不當所構成的。杰出的選材、固定、脫水過程是免疫組化質控的條件，假如H&E切片都做不出滿足的染色成果，那么免疫組化染色也將無從談起，底子無法確保染色質量。
2．固定：在很多的安排固定液中（如甲醛、乙醇、戊二醛、多聚甲醛 等），不一樣的試驗辦法在使用上各有千秋。但在堅持安排細胞構造的完整性、抗原可測定性、安排滲透性以及試劑的報價上，福爾馬林是、既經(jīng)濟又通用。而含酸或含汞的固定液對抗原保留均不抱負。安排離體后固定通常不要超過30分鐘，在常溫條件下固定時間為8-24小時。一起還要留意防止福爾馬林過度固定構成的安排抗原丟掉，有研究發(fā)現(xiàn)新鮮安排經(jīng)過福爾馬林一周固定后安排抗原丟掉嚴峻，抗原簡直不能被檢查，由于安排固定后會致使蛋白或蛋白分子之間構成交聯(lián)，致使抗原位點隱瞞，能夠經(jīng)過抗原批改辦法來批改，若加抗體前不選用抗原批改，則免疫組化染色常不能到達抱負成果或不成功。安排同樣不能*放置在70%的乙醇中，酒精固定后的安排形狀不如福爾馬林固定的安排。脫鈣液對抗原損壞較為嚴峻，因而在安排脫鈣前在福爾馬林液中固定48小時，若安排沒有固定透則酸會損壞抗原，脫鈣液中酸的濃度與脫鈣時間都必須盡量控制在zui低的限度。
