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商鋪產(chǎn)品：7536條

所在地區(qū)：江蘇鹽城市

聯(lián)系人：邵大衛(wèi) （銷(xiāo)售經(jīng)理）

技術(shù)文章

大鼠Ⅱ型膠原（Col Ⅱ）試劑盒操作步驟

閱讀：172發(fā)布時(shí)間：2015-7-9

1.  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。 
12μg/L  5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品  150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
6μg/L  4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品  150μl的5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
3μg/L  3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品  150μl的4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
1.5μg/L  2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品  150μl的3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
0.75μg/L  1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品  150μl的2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
2.  加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同） 、標(biāo)準(zhǔn)孔、
待測(cè)樣品孔。 在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl， 待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。 
3.  溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。       
4.  配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用 
5.  洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復(fù) 5次，拍干。 
6.  加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。   
7.  溫育：操作同3。 
8.  洗滌：操作同5。 
9.  顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘. 
10.  終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色） 。 
11.  測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值） 。 測(cè)定應(yīng)在加終止
液后 15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。


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