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江蘇寶萊生物科技有限公司
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更新時間：2015-01-22 12:49:36瀏覽次數(shù)：129次
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小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子elisa試劑盒用途：ELISA法定量測定血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量?？蒲袑嶒灥阮I(lǐng)域科學(xué)研究，不得用于臨床診斷
產(chǎn)品名稱：小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子elisa試劑盒
英文名稱: Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1,elisa kit
規(guī)格：96T
保存條件：2-8℃低溫保存
特異性：本試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
保質(zhì)期：六個月
用途：ELISA法定量測定血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量?？蒲袑嶒灥阮I(lǐng)域科學(xué)研究，不得用于臨床診斷
實驗原理：用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、*化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子elisa試劑盒洗滌方法:
1. 自動洗板機：每孔加入洗滌液350μl，注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350μl，浸泡1-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體，在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫；試劑或樣品配制時，均需充分混勻，并盡量避免起泡。
1.加樣：分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加于酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜，37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體，甩干，每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制)，酶標板加上覆膜，37℃溫育1小時。
3.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時。
5.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl，酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長，但不可超過30分鐘。當標準孔出現(xiàn)明顯梯度時，即可終止)。
7.每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標儀電源，預(yù)熱儀器，設(shè)置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。
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