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大鼠α*S轉(zhuǎn)移酶elisa試劑盒標(biāo)本的保存方法:
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè).如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng).如在冰箱中保存過(guò)久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深.一般說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存.凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩.混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,澄清后再檢測(cè).反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存.保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無(wú)菌操作,也可加入適當(dāng)防腐劑.
測(cè)試步驟:
(1)仔細(xì)切開(kāi)覆蓋在孔板上的箔片,從微孔板底部用手指輕輕頂出所用的孔板。注意不要損傷不使用的孔板上的條或孔,而且應(yīng)將其立即用塑料袋密封放入2-8℃的冰箱保存,以防止瓊脂變干;
(2)揭開(kāi)覆蓋在孔板上的箔片,每孔加入80mL牛奶樣品。并分別加入80mL的陰性和陽(yáng)性質(zhì)控,加入樣品時(shí)應(yīng)避免交叉污染;
(3)用密封膠將孔板密封,置于65℃恒溫箱或水浴箱中孵育直到陰性質(zhì)控轉(zhuǎn)化成淺黃綠色(參照每批質(zhì)量檢測(cè)報(bào)告,大約需要1小時(shí)45分鐘)。
注:如果是采用水浴進(jìn)行孵育的話,請(qǐng)注意避免水進(jìn)入微孔。樣品孵育時(shí)間不能超過(guò)質(zhì)檢報(bào)告中說(shuō)明的時(shí)間,否則檢測(cè)靈敏度會(huì)下降。
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