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技術(shù)文章

液相色譜儀測(cè)定蜂蜜中的果糖、葡萄糖和蔗

閱讀:1038發(fā)布時(shí)間:2017-6-20

蜂蜜是一種高度復(fù)雜的糖類過(guò)飽和混合物。它的主要成分是碳水化合物,含有果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、松二糖和糊精等20余種。蜂蜜中的糖類占總成分的70%~80%,蜂蜜中以單糖(果糖、葡萄糖)為主要成分,約占總成分的60%以上,其次是雙糖,雙糖中以蔗糖占優(yōu)勢(shì),成熟的蜂蜜平均不超過(guò)5%(少數(shù)品種例外),更多的則在1%~3%左右。

 

GB18796-2005《蜂蜜》中規(guī)定蜂蜜中不得添加或混入任何糖類、代糖類物質(zhì),不得添加或混入任何防腐劑、澄清劑、增稠劑等異物,并規(guī)定了對(duì)蜂蜜摻假的檢測(cè)方法和判定原則。

實(shí)驗(yàn)采用液相色譜法測(cè)定蜂蜜中的果糖、葡萄糖和蔗。

 

一、儀器設(shè)備

LC-600B梯度液相色譜儀

 

 

LC-600B智能全控液相色譜系統(tǒng)由2臺(tái)P600B高壓恒流泵、1臺(tái)UV600B紫外檢測(cè)器與1臺(tái)SCL600B系統(tǒng)控制器直接構(gòu)成梯度分析系統(tǒng)。*采用柱塞浮動(dòng)式安裝方式,增強(qiáng)儀器性能的穩(wěn)定性和使用的持久性??蓮V泛應(yīng)用于研究開(kāi)發(fā)、醫(yī)藥檢驗(yàn)、食品檢測(cè)、化工分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)等眾多分析領(lǐng)域。

 

二、實(shí)驗(yàn)方法

1.標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

標(biāo)準(zhǔn)貯備液配制:分別稱取果糖、葡萄糖、蔗糖標(biāo)準(zhǔn)品5g、4g、1g,至0.0001g,放入100mL容量瓶中,加入60mL水溶解,乙腈定容至體積,搖勻。

標(biāo)準(zhǔn)工作溶液配制:吸取不同體積的果糖、葡萄糖、蔗糖標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液,用乙腈+水(40+60)稀釋至體積,配成不同濃度的果糖、葡萄糖、蔗糖標(biāo)準(zhǔn)工作溶液,用于繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。

2.試樣制備

對(duì)無(wú)結(jié)晶的實(shí)驗(yàn)室樣品,將其攪拌均勻,對(duì)有結(jié)晶的樣品,在密閉的情況下,置于不超過(guò)60℃的水浴中溫?zé)?,振蕩,待樣品全部融化后攪勻,冷卻至室溫。

3.稱量提取

稱取5g試樣,至0.001g,置于100mL燒杯中,加入30mL水,用玻璃棒攪拌使試樣*溶解,轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中, 然后再用10mL水洗燒杯3次并轉(zhuǎn)移至上述100mL容量瓶中,用乙腈定容至體積,混勻(同時(shí)做兩個(gè)平行樣及試劑空白樣),靜止片刻后,取上清液用0.45u濾膜過(guò)濾進(jìn)樣。

 

三、色譜條件

色譜柱

Kromsil氨基柱4.6μm×250mm

流動(dòng)相

乙腈∶水=70∶30(使用前過(guò)濾并超聲脫氣)

流速

1mL/min

檢測(cè)器溫度

30℃

進(jìn)樣量

10μL

 

 


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