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南京科捷檢測(cè)科技發(fā)展有限公司
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閱讀：1323發(fā)布時(shí)間：2017-6-21
在蘋果汁加工過(guò)程中,酚類物質(zhì)與果汁中的蛋白質(zhì)結(jié)合,形成大分子的聚合物,從而使蘋果汁產(chǎn)生沉淀,影響蘋果汁的產(chǎn)品質(zhì)量。酚類物質(zhì)是果實(shí)在生長(zhǎng)代謝中的次生產(chǎn)物,它對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育和調(diào) 節(jié)、基因的誘導(dǎo)表達(dá)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、紫外輻射的吸收、果蔬產(chǎn)品的褐變、生物固氮有一定的影響。
實(shí)驗(yàn)利用液相色譜分析酚類物質(zhì),采用反相C18柱,具有快速、操作簡(jiǎn)單、分離效果好和同時(shí)能將不同酚類物質(zhì)分開(kāi)等優(yōu)點(diǎn)。
儀器設(shè)備
LC-600B智能全控液相色譜系統(tǒng)由2臺(tái)P600B高壓恒流泵、1臺(tái)UV600B紫外檢測(cè)器與1臺(tái)SCL600B系統(tǒng)控制器直接構(gòu)成梯度分析系統(tǒng)。*采用柱塞浮動(dòng)式安裝方式，增強(qiáng)儀器性能的穩(wěn)定性和使用的持久性。可廣泛應(yīng)用于研究開(kāi)發(fā)、醫(yī)藥檢驗(yàn)、食品檢測(cè)、化工分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)等眾多分析領(lǐng)域。
色譜分析條件
色譜柱 | Discovery C18柱150mm×4.6mm,Φ5μm |
流動(dòng)相 | 甲醇和水 |
柱溫 | 30℃ |
流速 | 1.2mL/min |
進(jìn)樣量 | 10μL |
檢測(cè)器 | 紫外檢測(cè)器 |
波長(zhǎng) | 280nm |
線性梯度洗脫 | 0～35min 98%甲醇和水;35～65min 68%甲醇和水;65～70min 98%甲醇和水。 |
樣品的制備
（1）分析樣品的制備:蘋果皮5g(或肉10g),加入1mL 6mol/L的HCl,放置于石英砂中研磨;加50mL的蒸餾水用1 mol/L的HCl調(diào)pH至2.0;然后每次加入50mL的乙酸乙酯,萃取兩次,攪拌5min,離心,分離出酯相和水相;將水相用6 mol/L的NaOH調(diào)pH至7.0,每次加入50mL的乙酸乙酯萃取2次,分離出酯相。將酯相在30℃下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),用N2氣吹干,再用1mL的甲醇定容。
（2）果汁樣品的制備:蘋果汁50.0mL用1 mol/L的HCl調(diào)pH至2.0,然后每次加入50mL的乙酸乙酯萃取兩次,攪拌5min,離心,分離出酯相和水相。酯相和水相的處理方法與分析樣品的制備方法一樣。
色譜圖分析：
酚類物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)樣品的液相色譜圖
1—兒茶酚; 2—兒茶素; 3—綠原酸; 4—表兒茶素;
5—根皮苷; 6—楊梅黃酮; 7—桑色素; 8—槲皮素;
9—柚苷; 10—山*素; 11—芹菜素
蘋果果肉酚類物質(zhì)液相色譜圖
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