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南京科捷檢測科技發(fā)展有限公司
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閱讀：2079發(fā)布時間：2018-8-27
液相色譜是一類分離與分析技術(shù)，其特點是以液體作為流動相，固定相可以有多種形式，如紙、薄板和填充床等。在色譜技術(shù)發(fā)展的過程中．為了區(qū)分各種方法，根據(jù)固定相的形式產(chǎn)生了各自的命名，如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。
經(jīng)典液相色譜的流動相是依靠重力緩慢地流過色譜柱，因此固定相的粒度不可能太小(100μm～150μm左右)。分離后的樣品是被分級收集后再進行分析的，使得經(jīng)典液相色譜不僅分離效率低、分析速度慢，而且操作也比較復(fù)雜。直到20世紀60年代．發(fā)展出粒度小于10μm的固定相，并使用了高壓*和自動記錄的檢測器，克服了經(jīng)典液相色譜的缺點，發(fā)展成液相色譜，也稱為高壓液相色譜。
1.色譜柱的安裝
色譜柱在使用過程中避免強烈的碰撞和震動。各個廠家生產(chǎn)的色譜柱在接口尺寸上有差異，如果柱頭類型和不銹鋼毛細管接頭兩者類型不匹配，將會產(chǎn)生漏液或者死體積過大的現(xiàn)象。接頭比柱頭深度長，不易擰緊而漏液；接頭比柱頭深度短，柱頭內(nèi)留有空隙而產(chǎn)生死體積，使譜帶展寬和峰拖尾。
2.色譜柱的平衡
色譜柱平衡指的是用完整的分析程序，運行幾遍測試，等觀察到峰形、保留時間和峰面積穩(wěn)定為止，平衡即完成。另外，在使用緩沖鹽時，應(yīng)該先使用水過渡后，再將緩沖鹽引入色譜柱，以防止鹽析發(fā)生，從而損壞色譜柱。
3.色譜柱的保存
hao遵守色譜柱說明書中的保持方式。在實際應(yīng)用中為了方便也可以如下使用：短期保持用所用的流動相保存為佳，這樣做可以減少下次使用的平衡時間。一般情況下，建議長期用80%甲醇或乙腈來保存反相柱。純有機相保持有大限度減少鍵合相水解的作用，但純甲醇（乙腈）又會將已水解而暫時吸附在柱內(nèi)的鍵合相洗脫出去，使固定相流失進程加快，縮短壽命；另外，純有機相保存時，溶劑易揮發(fā)，導(dǎo)致柱床變干，也會容易損壞色譜柱。正相柱一般應(yīng)保持在所用流動相中。
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