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商鋪產(chǎn)品:815條

所在地區(qū):江蘇南京市

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技術(shù)文章

液相色譜專業(yè)小知識(shí)集合

閱讀:1317發(fā)布時(shí)間:2019-3-28

流動(dòng)相:

1、流動(dòng)相應(yīng)選用色譜純?cè)噭?、高純水或雙蒸水,酸堿液及緩沖液需經(jīng)過(guò)濾后使用,過(guò)濾時(shí)注意區(qū)分水系膜和油系膜的使用范圍;

2、水相流動(dòng)相需經(jīng)常更換(一般不超過(guò)2天),防止長(zhǎng)菌變質(zhì);

3、使用雙泵時(shí),A、B、C、D四相中,若所用流動(dòng)相中有含鹽流動(dòng)相,則A、D(進(jìn)液口位于混合器下方)放置含鹽流動(dòng)相,B、C(進(jìn)液口位于混合器上方)放置不含鹽流動(dòng)相;A、B、C、D四個(gè)儲(chǔ)液器中其中一個(gè)為棕色瓶,用于存放水相流動(dòng)相。

樣品:

1、采用過(guò)濾或離心方法處理樣品,確保樣品中不含固體顆粒;

2、用流動(dòng)相或比流動(dòng)相弱(若為反相柱,則極性比流動(dòng)相大;若為正相柱,則極性比流動(dòng)相?。┑娜軇┲苽錁悠啡芤海M量用流動(dòng)相制備樣品液;手動(dòng)進(jìn)樣時(shí),進(jìn)樣量盡量小,使用定量管定量時(shí),進(jìn)樣體積應(yīng)為定量管的3~5倍。

色譜柱:

1、使用前仔細(xì)閱讀色譜柱附帶的說(shuō)明書(shū),注意適用范圍,如pH值范圍、流動(dòng)相類型等;

2、使用符合要求的流動(dòng)相;

3、使用保護(hù)柱;

4、 如所用流動(dòng)相為含鹽流動(dòng)相,反相色譜柱使用后,先用水或低濃度甲醇水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇沖洗;

5、 色譜柱在不使用時(shí),應(yīng)用甲醇沖洗,取下后緊密封閉兩端保存;

6、 不要高壓沖洗柱子;

7、 不要在高溫下長(zhǎng)時(shí)間使用硅膠鍵合相色譜柱。

液相色譜儀操作過(guò)程

1、開(kāi)機(jī)操作:

① 打開(kāi)電源,用Harb相連接時(shí),注意Harb電源,打開(kāi)計(jì)算機(jī),打開(kāi)Bootp Server(一般啟動(dòng)時(shí)已打開(kāi));

 

② 自上而下打開(kāi)個(gè)組件電源,Bootp Server里顯示有信號(hào)時(shí)(有六行字符),打開(kāi)工作站(先打開(kāi)On line);

③ 打開(kāi)沖洗泵頭的10%異丙醇溶液的開(kāi)關(guān)(需用針捅抽),控制流量大小,以能流出的小流量為準(zhǔn);

④ 注意各流動(dòng)相所剩溶液的容積設(shè)定,若設(shè)定的容積低于低限會(huì)自動(dòng)停泵,注意洗泵溶液的體積,及時(shí)加液;

⑤ 使用過(guò)程中要經(jīng)常觀察儀器工作狀態(tài),及時(shí)正確處理各種突發(fā)事件。

2、 先以所用流動(dòng)相沖洗系統(tǒng)一定時(shí)間(如所用流動(dòng)相為含鹽流動(dòng)相,必須先用水沖洗20分鐘以上再換上含鹽流動(dòng)相),正式進(jìn)樣分析前30min 左右開(kāi)啟D燈或W燈,以延長(zhǎng)燈的使用壽命;

3、 建立色譜操作方法,注意保存為自己命名的Method,勿覆蓋或刪除他人的方法及實(shí)驗(yàn)結(jié)果;

4、 使用手動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣時(shí),在進(jìn)樣前和進(jìn)樣后都需用洗針液洗凈進(jìn)樣針筒,洗針液一般選擇與樣品液一致的溶劑,進(jìn)樣前必須用樣品液清洗進(jìn)樣針筒3遍以上,并排除針筒中的氣泡;

5、 溶劑瓶中的沙芯過(guò)濾頭容易破碎,在更換流動(dòng)相時(shí)注意保護(hù),當(dāng)發(fā)現(xiàn)過(guò)濾頭變臟或長(zhǎng)菌時(shí),不可用超聲洗滌,可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗滌;

6、 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,一般先用水或低濃度甲醇水溶液沖洗整個(gè)管路30分鐘以上,再用甲醇沖洗。沖洗過(guò)程中關(guān)閉D燈、W燈;

7、 關(guān)機(jī)時(shí),先關(guān)閉泵、檢測(cè)器等,再關(guān)閉工作站,然后關(guān)機(jī),后自下而上關(guān)閉色譜儀各組件,關(guān)閉洗泵溶液的開(kāi)關(guān);

8、 使用者須認(rèn)真履行儀器使用登記制度,出現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)向老師報(bào)告,不要擅自拆卸儀器。

附常見(jiàn)故障排除方法

1、操作過(guò)程若發(fā)現(xiàn)壓力很小,則可能管件連接有漏,注意檢查。當(dāng)出現(xiàn)錯(cuò)誤警告(各組件指示燈均為紅色),一般為漏液,其中一個(gè)感應(yīng)器中已有溶劑,漏液故障排除后,擦干,點(diǎn)擊On line操作界面中的Instrument/System Off,然后再點(diǎn)擊操作界面中的Instrument/System On即可;

2、連接柱子與管線時(shí),應(yīng)注意擰緊螺絲的力度,過(guò)度用力可導(dǎo)致連接螺絲斷裂。柱接頭處易發(fā)生漏液,可能情況為接頭Fittings中間的管子未和接口處貼緊。不同廠家的管線及色譜柱頭結(jié)構(gòu)有差異,hao不要混用,必要時(shí)可使用PEEK管及活動(dòng)接頭;

3、操作過(guò)程若發(fā)現(xiàn)壓力非常高,則可能管路已堵,應(yīng)先卸下色譜柱,然后用分段排除法檢查,確定何處堵塞后解決。若是保護(hù)柱或色譜柱堵塞,可用小流量流動(dòng)相或以小流量異丙醇沖洗,還可采用小流量反沖的辦法(新柱不提倡),若還是無(wú)法通暢,則需換柱;

4、運(yùn)行過(guò)程中自動(dòng)停泵,可能為壓力超過(guò)上限或流動(dòng)相用完;

5、樣品瓶中樣品較少,自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣針無(wú)法到達(dá)液面,可采用調(diào)低進(jìn)樣針進(jìn)樣高度的辦法,注意設(shè)置時(shí)不要使進(jìn)樣針碰到瓶底,微量樣品分析應(yīng)使用微量樣品瓶;

6、自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣針未與樣品瓶瓶口對(duì)準(zhǔn)時(shí),需重新定位;

7、泵壓不穩(wěn)或流量不準(zhǔn),可能為柱塞桿密封圈問(wèn)題或seal wash墊圈問(wèn)題,需更換;

8、基線產(chǎn)生不規(guī)則噪聲,可能原因?yàn)橄到y(tǒng)不穩(wěn)定或沒(méi)達(dá)到化學(xué)平衡(使其平衡,若用離子對(duì)試劑,在使用使需要足夠的時(shí)間和溶劑體積,色譜柱才能達(dá)到足夠的平衡),流動(dòng)相被污染(更換流動(dòng)相,清洗儲(chǔ)液器、過(guò)濾器,沖洗并重新平衡系統(tǒng)),色譜柱被污染(為證明可能的原因更換系統(tǒng)的色譜柱或使用一根同類的被證明性能好的色譜柱),檢測(cè)器不穩(wěn)定;

9、短期有規(guī)則的噪聲,可能原因?yàn)楸脡翰环€(wěn)或泵脈沖,調(diào)節(jié)溶劑不適當(dāng)(如兩種溶劑的互溶性問(wèn)題),泵入口管路松或堵塞,泵太臟,泵柱塞磨損,檢測(cè)器不穩(wěn)定;

10、長(zhǎng)期有規(guī)則噪聲,可能原因?yàn)槭覝夭环€(wěn)(未使用柱溫箱)或使用柱溫箱不當(dāng);

11、基線漂移,可能原因?yàn)橄到y(tǒng)不穩(wěn)或沒(méi)有達(dá)到化學(xué)平衡,室溫不穩(wěn)(未使用柱溫箱),流動(dòng)相污染或分解,柱污染,檢測(cè)池泄漏,系統(tǒng)泄漏,固定相流失(另選流動(dòng)相,另選色譜柱),測(cè)定的波長(zhǎng)選擇錯(cuò)誤(對(duì)溶劑有吸收),樣品組分保留太長(zhǎng)(用強(qiáng)度合適的溶劑清洗色譜柱),檢測(cè)器不穩(wěn)定;

12、每次進(jìn)樣時(shí)的保留時(shí)間不重復(fù),可能原因?yàn)橄到y(tǒng)不穩(wěn)或未達(dá)到化學(xué)平衡,由于氣泡、各部件磨損等原因引起的泵壓或泵脈沖輸液不穩(wěn)定,進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高平衡被破壞,溶劑配比不合適,柱被污染;

13、無(wú)峰,可能原因?yàn)闄z測(cè)器選擇錯(cuò)誤,使用錯(cuò)誤的流動(dòng)相,樣品降解;

14、色譜峰比預(yù)計(jì)的小,可能原因?yàn)檫M(jìn)樣體積錯(cuò)誤,檢測(cè)器燈故障,進(jìn)樣問(wèn)題(瓶號(hào)錯(cuò)、進(jìn)樣體積不合適、進(jìn)樣錯(cuò)誤、針頭堵塞);

15、峰變寬,可能原因?yàn)檫M(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高,過(guò)濾器、保護(hù)柱入口、柱入口或連接管路有部分堵塞,檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)設(shè)置錯(cuò)誤,進(jìn)樣器問(wèn)題(如閥漏、針頭堵塞或損壞),柱或保護(hù)柱被污染,對(duì)流動(dòng)相來(lái)說(shuō)樣品溶劑太強(qiáng),使用錯(cuò)誤的色譜柱,溫度變化;

16、出現(xiàn)雙峰/肩峰,可能原因?yàn)楸Wo(hù)柱或柱入口部分阻塞,柱或保護(hù)柱被污染,柱性能下降,保護(hù)柱失效,進(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高(樣品過(guò)載),平衡破壞;

17、前沿峰,可能原因?yàn)檫M(jìn)樣體積太大或樣品濃度太高(樣品過(guò)載),平衡破壞,對(duì)于流動(dòng)相來(lái)說(shuō)樣品溶劑非極性太強(qiáng)(對(duì)于反相柱),柱或保護(hù)柱被污染,柱性能下降,保護(hù)柱失效;

18、脫尾峰,可能原因?yàn)橹虮Wo(hù)柱被污染,柱性能下降,保護(hù)柱失效,進(jìn)樣器問(wèn)題(如閥漏等),檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)設(shè)置錯(cuò)誤;

19、出現(xiàn)鬼峰,可能原因?yàn)榱鲃?dòng)相被污染,樣品預(yù)處理時(shí)產(chǎn)生降解或混入雜質(zhì),先前進(jìn)樣的流出物,樣品定量管清洗不當(dāng),注射器臟,柱被污染,進(jìn)樣裝置被污染,流動(dòng)相中含有穩(wěn)定劑/穩(wěn)定劑變化。

 

南京科捷專業(yè)生產(chǎn)研發(fā)氣相色譜儀,液相色譜儀,紫外線可見(jiàn)分光光度,頂空進(jìn)樣器,等多樣分析儀器以及配套產(chǎn)品,公司有著16年的生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)!
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