一、概述
目前,市面上糖果的種類越來越多,它特殊的甜味和鮮艷的色彩深受消費(fèi)若青睞。五顏六色的糖果中添加了多種人工合成色素,這些色素具有色澤鮮艷、著色力強(qiáng)、性質(zhì)穩(wěn)定和價(jià)格便宜等優(yōu)點(diǎn),但色素是偶氮類染料,是以煤焦油中分離出來的苯胺染料為原料制成的,*食用人工合成色素,將會(huì)在體內(nèi)畜積,對(duì)腎臟、肝臟產(chǎn)生一-定的傷害,因此必須對(duì)其加以檢測"。國標(biāo)GB/T5009.35-200312中第-一法為高效液相色譜法,由于具有靈敏度高,分離好,快速的特點(diǎn),已被廣泛使用。但在具體操作中,存在不少問題,文獻(xiàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化已有報(bào)道。本文對(duì)該法的條件加以探討和改進(jìn),對(duì)于檢測含糖量高的樣品,取得很好的效果。
二、糖果色素檢測分析檢測液相色譜實(shí)驗(yàn)方案
1.主要儀器
南京科捷Lc600a高效液相色譜儀(由四元梯度泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、VWD和DAD檢測器組成) ,真空泵.抽濾器, G3垂融漏斗,0.45 μm針式濾膜,高速離心機(jī)。
2.儀器簡介
糖果色素檢測分析檢測液相色譜LC-600A智能全控液相色譜系統(tǒng)由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。使用WS600工作站可以同時(shí)控制數(shù)臺(tái)P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等,實(shí)行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。

3.主要試劑
甲醇為HPLC級(jí),乙酸銨為分析純,實(shí)驗(yàn)用水為超純水,色素標(biāo)準(zhǔn)品國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心),甲酸-甲醇混合溶液(4+6),無水乙醇- 2%氨水-純水混合溶液(7 +2+ 1),聚酰胺粉(200目),乙酸為分析純(36%) ,檸檬酸溶液(20%), pH6的水(檸檬酸溶液調(diào)pH到6),pH4的水(檸檬酸溶液調(diào)pH到4)。
4.標(biāo)準(zhǔn)溶液
混合標(biāo)準(zhǔn)過渡液的配制臨用時(shí) 用水將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋,配成0.050 g/L的色素水溶液。
5.樣品前處理
將糖果敲碎,混合均勻后,稱10 到燒杯中,加20 m1水,溫?zé)崛芙?用檸檬酸溶液調(diào)pH到6,加熱至60^C,在 樣品溶液中加入聚酰胺粉,攪拌均勻,調(diào)成糊狀,以G3垂融漏斗抽濾,用60°CpH為4的水洗滌3~5次,然后用甲醇-甲酸混合溶液洗滌3~5次,再用水洗到中性,用約30 m1的無水乙醇-2%氨水- 純水混合溶液解吸3~5次,洗至無色.收集解吸液于高腳燒杯中,用乙酸中和,加玻璃珠,在沸水浴上濃縮至5% ,加水定容至5 m1,經(jīng)0. 45 μm濾膜過濾,待測。
6.色譜條件
色譜柱:ODS- Cs柱(150 X4. 6 mm,5 μm) ,C預(yù)柱,柱溫
30C,流動(dòng)相A為甲醇,B為乙酸銨溶液(0. 02 mol/L) ,梯度洗脫見表1),流速1.0m1/min進(jìn)樣量 10μl。
三、性能特點(diǎn)
◆ LC-P600型高壓恒流泵
(1)往復(fù)式并聯(lián)泵設(shè)計(jì),流量精度高,壓力脈動(dòng)小,延長密封圈和活塞桿的使用壽命;
(2)隔膜式脈沖阻尼器與電子脈動(dòng)抑制技術(shù)同時(shí)控制壓力脈動(dòng)保障低的基線噪音;
(3)整體性單向閥,結(jié)構(gòu)簡單,密封性好;
(4)柱塞桿自動(dòng)縮進(jìn),方便更換密封圈;
(5)可選配柱后清洗功能,適用于使用含緩沖鹽的分析條件;
◆ LC600-UV600型紫外檢測器
(1)平行雙錐孔設(shè)計(jì)的流動(dòng)池,大幅提高信噪比,檢測效果更佳;
(2)開機(jī)自檢功能,通過圖譜上486.6nm和656nm這二點(diǎn)的位置,以判斷波長示值誤差的準(zhǔn)確性,保證極優(yōu)的波長精度,保障儀器jia狀態(tài);
(3)控制電路采用多微處理器結(jié)構(gòu),分別管理信號(hào)采集、數(shù)據(jù)處理,系統(tǒng)控制和通信。在做等度分析時(shí),可以方便地通過全漢字的液晶屏與七個(gè)功能鍵,設(shè)置波長、濾波常數(shù)、輸出量程,運(yùn)行時(shí)間等參數(shù)。并且可以實(shí)現(xiàn)開關(guān)氘燈,光譜掃描,啟動(dòng)分析程序等功能;
(4)全數(shù)字交換系統(tǒng),避免了色譜信號(hào)需要多重摸-數(shù)轉(zhuǎn)換帶來的信號(hào)畸變與干擾;
◆ LC-WS600色譜工作站
(1)具有液相色譜系統(tǒng)控制和色譜數(shù)據(jù)處理雙重功能
(2)六種定量計(jì)算方法
(3)多種不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)試樣校準(zhǔn)運(yùn)行,建立樣品濃度──面積校正曲線。
(4)靈活的峰識(shí)別和處理能力
(5)色譜圖形、定量計(jì)算方式、峰處理參數(shù)及峰鑒定表等可保存到用戶自命名的文件中。
◆具有自動(dòng)在線檢測功能
四、技術(shù)指標(biāo)
輸液單元 | 型號(hào) | P600(分析型) |
輸液形式 | 雙柱塞住復(fù)式并聯(lián) |
gao工作壓力 | 42MPa |
流量設(shè)定范圍 | 0.001mL/min~9.999mL/min |
流量精確度 | RSD<0.07% |
脈動(dòng) | 0.1Mpa |
電源 | 220V/110V |
紫外檢測器 | 型號(hào) | UV100 |
光源 | D2燈 |
波長范圍 | 190~700nm |
波長準(zhǔn)確度 | ±1nm |
波長精密度 | 0.1nm以下 |
噪音 | ±0.25x10-5AU/h(靜態(tài))/±1x10-5AU(動(dòng)態(tài),在條件下) |
漂移 | 不超過0.4x10-4AU/h(靜態(tài))/2x10-4AU/h(動(dòng)態(tài),在條件下) |
小檢測濃度 | 5x10-9g/ml |
流通池體積 | 8μL |
電源 | 220V/110V |
柱溫箱 | 型號(hào) | CO600 |
控溫范圍 | 室溫上5℃-80℃ |
溫度設(shè)定誤差 | ±2℃ |
溫度精度 | ±0.1℃ |
電源 | 220V/110V |
整機(jī) 測試 | 定性重復(fù)性 | RSD6≤0.2%(萘/甲醇標(biāo)樣) |
定量重復(fù)性 | RSD6≤0.5%(萘/甲醇標(biāo)樣) |
色譜工作站 | 型號(hào) | WS600 |
信號(hào)運(yùn)輸方式 | 全數(shù)字信號(hào) |
操作方式 | 可反控并監(jiān)測儀器各單元運(yùn)行 |
界面 | 全中文界面/英文界面(可選) |
安裝方式 | 內(nèi)置式,光盤裝入 |
可選檢測器 | 型示差折光檢測器 | RI2000型 |
型示差折光檢測器 | RI-201H型 |
熒光檢測器 | RF-20A |
二級(jí)管陣列檢測器 | SPD-M20A |
藥典型蒸發(fā)光散射檢測器 | ELSD-5000 |
藥典型蒸發(fā)光散射檢測器 | ELSD-180 |