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上海嵐派生物科技有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間:2015-11-11 11:08:57瀏覽次數(shù):42次
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兔子γ干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷!
特惠產(chǎn)品,現(xiàn)貨供應(yīng):兔子γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒說明書
英文名稱:rabbit Interferon γ ,IFN-γ ELISA試劑盒
試劑盒保存:2-8℃(頻繁使用時);-20℃(較長時間不用時)。
性狀:試劑盒kit(含試劑+酶聯(lián)板+覆膜等)
規(guī)格:48T/96T,可以提供定量和定性。
注意要點:請仔細閱讀產(chǎn)品的詳細使用說明,嚴格遵照規(guī)定操作,必能得出準確的結(jié)果.
兔子γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒說明書 操作方法:
一、雙抗體夾心法
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
二、間接法
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;
2.次日洗滌3次;
3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;
4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分鐘,洗滌;
6.’zui后一遍用DDW洗滌。
其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。
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