人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞,THP-1進(jìn)口細(xì)胞基本特性
細(xì)胞數(shù)量:100萬個(gè)細(xì)胞數(shù)
細(xì)胞檢測(cè):細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
細(xì)胞運(yùn)輸:干冰運(yùn)輸(1 Vial)或活細(xì)胞運(yùn)輸(T-25 flasks)
細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
形態(tài)特性:?jiǎn)魏思?xì)胞
生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)
特征特性:人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞,THP-1細(xì)胞該細(xì)胞從一名1歲的患有急性單核細(xì)胞性白血病的男孩的外周血中分離建立。該細(xì)胞可以吞噬乳膠顆粒和激活的紅細(xì)胞,細(xì)胞膜和胞漿內(nèi)均沒有免疫球蛋白,表達(dá)C3R和FcR;可受佛波酯TPA誘導(dǎo)向單核系方向分化;可作為轉(zhuǎn)染宿主。
培養(yǎng)條件:RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法:維持細(xì)胞濃度在2~4×105~8×105/ml,勿超過1×106/ml;2~3天換液1次。
傳代情況:C5
凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè):培養(yǎng)法(-)
STR:Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,13;D13S317:8,13;D16S539:11,12;D18S51:13,14,15;D19S433:12.2,13,14;D21S11:29,30,31.2;D2S1338:17,18;D3S1358:15,16,17;D5S818:11,12;D7S820:10;D8S1179:10,14;FGA:22,24,25;TH01:7,8,9.3;TPOX:8,11;vWA:16;
染色體:80~84,48~52
使用權(quán)限:A類
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客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
操作臺(tái)的滅菌處理:
1)無菌室及無菌操作臺(tái)(laminarflow)用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘。
2)細(xì)胞用的培養(yǎng)基如有相同切記不可共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。 (注:實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之*無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。)
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
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