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上海博研生物工程研究中心
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更新時間:2015-04-20 17:08:07瀏覽次數:118次
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人永生化表皮細胞,HaCaT進口細胞基本特性
形態(tài)特性:上皮細胞樣
生長特性:貼壁生長
特征特性:人永生化表皮細胞,HaCaT細胞該細胞源自一位62歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚,角蛋白、角化細胞交聯(lián)外膜蛋白、中間絲相關蛋白陽性。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced
Salts) 15%FBS
傳代方法:1:10~1:20傳代,每周換液2~3次
傳代情況:C2
凍存條件:基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測:培養(yǎng)法(-)
STR:
Amelogenin:X;CSF1PO:9,11;D13S317:10,12;D16S539:9,12;D18S51:12;D19S433:13,14;D21S11:30.2;D2S1338:17,25;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:9,11;D8S1179:14;FGA:24;TH01:9.3;TPOX:11,12;vWA:16,17,OL;
染色體:72~88
使用權限:A類
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客戶收到細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進口胎牛血清. 剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
操作臺的滅菌處理:
1)無菌室及無菌操作臺(laminarflow)用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘。
2)細胞用的培養(yǎng)基如有相同切記不可共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細胞間污染。 (注:實驗操作應在抬面之*無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。)
培養(yǎng)細胞將復合細胞計數要求的細胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內,將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時間由細胞情況而定。
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