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信帆生物供應(yīng)寨卡病毒重組抗原標(biāo)記抗體，寨卡病毒（Zika Virus， ZIKV）是一種RNA病毒，屬于黃病毒科中的黃病毒屬，主要通過蚊子傳播。近幾年來，寨卡病毒在美洲地區(qū)爆發(fā)流行，感染人數(shù)達(dá)數(shù)百萬之多，并且有蔓延到其它地區(qū)的趨勢。

寨卡病毒（Zika Virus， ZIKV）是一種RNA病毒，屬于黃病毒科中的黃病毒屬，主要通過蚊子傳播。近幾年來，寨卡病毒在美洲地區(qū)爆發(fā)流行，感染人數(shù)達(dá)數(shù)百萬之多，并且有蔓延到其它地區(qū)的趨勢。分析顯示，寨卡病毒感染與新生兒小頭癥及成人的格林巴列綜合癥高度相關(guān)。動物試驗也證明寨卡病毒可感染腦神經(jīng)組織，導(dǎo)致小頭癥及其它出生缺陷。因此，寨卡病毒對公共健康已經(jīng)構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。但目前還沒有商業(yè)化的疫苗來預(yù)防寨卡病毒感染。

為了開發(fā)寨卡病毒基因工程疫苗，碩士研究生屈攀科等在黃忠和金俠的共同指導(dǎo)下，利用果蠅S2表達(dá)系統(tǒng)制備了基于寨卡病毒包膜蛋白（E）的不同長度重組蛋白，進一步在小鼠模型上評價這些重組蛋白疫苗的免疫原性和抗病毒保護效果。研究結(jié)果顯示，E蛋白的胞外區(qū)（稱為E80）及其結(jié)構(gòu)域III（稱為EDIII）均可在S2系統(tǒng)中高效表達(dá)；E80和EDIII疫苗都能在小鼠中誘導(dǎo)抗原特異性的抗體和T細(xì)胞免疫應(yīng)答；在自主研發(fā)的寨卡病毒感染小鼠模型中，E80免疫小鼠血清和EDIII免疫小鼠血清都具有顯著的抗病毒保護效果。值得指出的是，在相同劑量的情況下，EDIII疫苗所誘導(dǎo)的中和抗體效價比E80疫苗所誘導(dǎo)的中和抗體效價更高，而且能夠提供更強的保護作用。以上結(jié)果表明，S2細(xì)胞來源的EDIII是一個非常有前景的寨卡病毒基因工程疫苗原型，值得開展后續(xù)的前和研發(fā)。

建立檢測非結(jié)構(gòu)蛋白1(NS1)抗原的免疫層析膠體金試紙方法,用于寨卡病毒(ZIKV)感染的早期診斷。方法對已獲得的5株人源抗ZIKV NS1的單克隆抗體(ZKns2E11、ZKns3G2、ZKns4B8、ZKns4F10、ZKns14G5)采用生物膜層光學(xué)干涉法進行競爭抑制實驗,以得到它們在抗原結(jié)合位點的相互關(guān)系并根據(jù)抗體結(jié)合抗原表位的不同將其進行分類,又通過兩兩隨機組合配對方法篩選出佳捕獲抗體及包被抗體,制備成膠體金試紙。分別用重組NS1蛋白、感染ZIKV細(xì)胞培養(yǎng)上清液以及感染登革病毒(DENV)病人血清/血漿多種檢測樣品以獲得準(zhǔn)確的特異性和敏感性。其中病毒定量采用FFA(focus-forming assay)方法。結(jié)果在競爭抑制實驗結(jié)果中,根據(jù)抗體與抗原結(jié)合的剩余結(jié)合率(<20%被認(rèn)為強競爭關(guān)系即結(jié)合位點相似甚至相同,>60%被認(rèn)為無競爭關(guān)系即位點不同),抗體大致分為兩類,并通過兩兩配對篩選出2株結(jié)合位點不一致的佳配對抗體(ZKns2E11、ZKns3G2),終建立檢測ZIKV NS1抗原膠體金試紙的快速診斷方法。在試紙敏感性分析中,ZIKV重組NS1蛋白為31.25 ng/mL時肉眼仍可觀測到陽性條帶的出現(xiàn),以2×10~4FFU/mL的ZIKV病毒量感染細(xì)胞所釋放的NS1蛋白仍可被檢測到。試紙在其特異性上,無論是重組蛋白、感染病毒細(xì)胞培養(yǎng)上清液還是樣本,與DENV均不交叉,表現(xiàn)出良好的特異性。

寨卡病毒重組抗原標(biāo)記抗體