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線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)是一種以JC-1 為熒光探針,快速靈敏地檢測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒,可以用于檢測線粒體的健康狀態(tài),也是用來檢測細(xì)胞早期凋亡的常用方法。
是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm 的理想熒光探針。JC-1染料表現(xiàn)出電勢依賴性的積聚在線粒體內(nèi)。正常線粒體內(nèi),JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物,聚合物發(fā)出強烈的紅色熒光(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失,JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中,產(chǎn)生綠色熒光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。因此顏色的變化非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。線粒體的去極化程度也可以通過紅/綠熒光強度的比例來衡量。
線粒體膜電勢的破壞是細(xì)胞凋亡早期發(fā)生的一個標(biāo)志性事件。細(xì)胞受到凋亡誘導(dǎo)后線粒體膜電位的變化使得膜的通透性發(fā)生改變。膜通透性的增加,使得線粒體蛋白包括細(xì)胞色素C、Smac/DIABLO、HtrA2/OMI、核酸內(nèi)切酶G(EndoG)、凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)等從線粒體基質(zhì)釋放到細(xì)胞漿。細(xì)胞色素C的釋放伴隨膜電位的*喪失,進而引發(fā)細(xì)胞凋亡酶的級聯(lián)效應(yīng)。
JC-1染料的優(yōu)勢:
* 染料用途廣:可用來檢測各種細(xì)胞類型包括單核細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞,以及完整組織和純化的線粒體;
* 染料特異性更高:與其他的陽離子染料如DiOC6(3)和羅丹明123相比,對線粒體膜電位變化的特異性高于質(zhì)膜電位變化,對線粒體去極化檢測的檢測一致性更好;
* 紅綠色熒光強度比率只受線粒體膜電位的變化,不受線粒體大小,形狀,密度的差異干擾;
* 檢測靈敏度強,對細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)的微小異質(zhì)性都能辨別;
線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)
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