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單細(xì)胞分析技術(shù)的研究

時(shí)間:2015-4-27閱讀:157
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    研究人員利用這一傳感器發(fā)現(xiàn)了粘著斑蛋白承受力的奧秘。細(xì)胞對(duì)物理力量做出響應(yīng)的能力對(duì)于發(fā)育和生理來(lái)說(shuō)都是根本性的,包括血液、細(xì)胞粘附和遷移的調(diào)控。難以對(duì)活體細(xì)胞中的分子力進(jìn)行測(cè)量的難度限制了對(duì)此現(xiàn)象。

    新開(kāi)發(fā)的這種傳感器就是一種基因編碼的熒光張力感應(yīng)模塊,該模塊能夠在活體中測(cè)量穿過(guò)特定蛋白的機(jī)械力。研究人員利用這種傳感器對(duì)粘著斑蛋白進(jìn)行了測(cè)試——粘著斑蛋白是一種膜-細(xì)胞骨架蛋白,它被吸引到粘著斑上,并將細(xì)胞粘附分子(整合素)與肌動(dòng)蛋白細(xì)絲相連。結(jié)果他們發(fā)現(xiàn)粘著斑蛋白承受力的能力決定粘著斑在力的作用下是整合還是分解。

    這種新型生物傳感器應(yīng)能應(yīng)用于力傳導(dǎo)中所涉及的其它蛋白,主要優(yōu)點(diǎn)就是能的分析涉及的機(jī)械力,而且靈敏度高,比一般方法的靈敏度至少高100倍,也能用于檢測(cè)細(xì)胞膜表面變形情況。缺點(diǎn)就是蛋白接觸傳感器會(huì)改變蛋白的功能,因此研究人員需要花費(fèi)較多的時(shí)候嘗試。

    另外一個(gè)方面,來(lái)自伊利諾斯大學(xué)Taekjip Ha教授則利用了單分子熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)(FRET)分析了DNA解鏈酶的運(yùn)動(dòng)過(guò)程,他們將兩種染料分別連接到單鏈DNA的兩個(gè)末端,從而能直接觀察到DNA鏈的作用方式,結(jié)果研究人員發(fā)現(xiàn)這兩種染料能相互靠近,然后又分開(kāi),這樣重復(fù),其中PcrA螺旋酶并沒(méi)有沿著單鏈尾部移動(dòng),而是與DNA鏈斷裂端結(jié)合,拉動(dòng)DNA使之與結(jié)合蛋白分離。當(dāng)這一過(guò)程結(jié)束的時(shí)候,PcrA就會(huì)松開(kāi)。

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