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大鼠纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)96T

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2018-06-01 07:26:21瀏覽次數(shù):231次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

卡邁舒化學(xué)技術(shù)(上海)有限公司專(zhuān)業(yè)研發(fā)銷(xiāo)售各種屬科研ELISA試劑盒,并提供無(wú)償代檢測(cè)服務(wù),是國(guó)內(nèi)多家科研機(jī)構(gòu)及高校的ELISA試劑盒專(zhuān)業(yè)供應(yīng)商,大鼠纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒質(zhì)量保證,*,發(fā)貨及時(shí),運(yùn)輸嚴(yán)格,產(chǎn)品得到諸多單位科研工作者的認(rèn)可與支持,更有專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)用心為您的科研之路保駕護(hù)航,做您身邊的科研伴侶!

詳細(xì)介紹

大鼠纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒中內(nèi)容(96孔)

1. 重組人VEGF凍干標(biāo)準(zhǔn)品,10ng/管,總2管。

2. 預(yù)包被抗人VEGF抗體的96孔板。

3. 樣品稀釋液,30ml。 

4. *標(biāo)記抗人VEGF,120μl,效價(jià)1:100。

5. 抗體稀釋液,12ml。 

6. 親和素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物(ABC),120μl,效價(jià)1:100。

7. ABC稀釋液,12ml。

8. TMB顯色液,10ml。

9. TMB終止液,10ml。

大鼠纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒需要而未提供的試劑和器材

1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

2. 自動(dòng)洗板機(jī)。 

3. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測(cè)樣品較多時(shí),用多通道移液器。

4. 干凈的試管和Eppendof管。 

5. 使用中性PBS或TBS作為洗滌液。0.01M TBS配法為:1000ml H2O中加Tris 1.2g, NaCl 8.5g;  純乙酸450μl或濃鹽酸700μl左右調(diào)節(jié)pH值(7.2-7.6)。 0.01 M PBS(pH7.2-7.6)配法:1000ml蒸餾水中加氯化鈉8.5g, Na2HPO4·12H2O 3.5g, NaH2PO4·2H2O  0.25g。

洗板方法 

手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將*的PBS或TBS洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。 

自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。

操作程序 

所有試劑用前需在室溫平衡。試劑或樣品稀釋時(shí),切不可忘記混勻。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果估計(jì)樣品VEGF濃度>2000pg/ml時(shí),應(yīng)在試管中將樣品用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋?zhuān)允箻悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍。 

1. 確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目,并增加1孔作為T(mén)MB空白顯色孔。總數(shù)=樣品數(shù)+9;做雙份檢測(cè)時(shí)×2。其余重包裝好放如冰箱中。 

2. 將1000pg/ml ,500pg/ml,250pg/ml,125pg/ml,62.5pg/ml,31.3pg/ml,15.6pg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對(duì)于人血清、體液、組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清,每孔先加50μι樣品稀釋液,再加50μι樣品。

3. 酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng)120分鐘。

4. 反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體(將自動(dòng)洗板機(jī)的洗滌次數(shù)設(shè)為零再開(kāi)始即可);或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對(duì)著吸水紙拍幾下。不洗。

5. 將準(zhǔn)備好的*抗人VEGF抗體工作液按每孔0.1ml依次加入(TMB空白顯色孔除外)。37℃反應(yīng)60分鐘。 

6. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌3次,每次浸泡1分鐘左右。吸去或甩去多余液體。

7. 將準(zhǔn)備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入(TMB空白顯色孔除外)。37℃反應(yīng)30分鐘。

8. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌5次,每次浸泡1-2分鐘左右。吸去或甩去多余液體。

9. 按每孔0.1ml依次加入TMB顯色液,37℃避光反應(yīng)20-25分鐘(此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔差別不明顯)。 

10. 按每孔0.1ml依次加入TMB終止液,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。 

11. 用酶標(biāo)儀在450nm測(cè)定O.D.值,將TMB空白顯色孔設(shè)為對(duì)照。 

12. 所有的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的吸光值減去零孔的吸光值后,在坐標(biāo)紙上畫(huà)出曲線,以吸光值作為縱坐標(biāo),以濃度作為橫坐標(biāo)。 

13. 根據(jù)樣品的吸光值在坐標(biāo)上找出對(duì)應(yīng)的濃度。用戶(hù)也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算(下載)。應(yīng)記住由于樣品稀釋了1倍,其實(shí)際濃度應(yīng)該×2。

大鼠纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒操作程序總結(jié): 

1. 加樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,37℃反應(yīng)120分鐘。不洗。 

2. 加*標(biāo)記抗體,37℃反應(yīng)60分鐘。0.01M TBS洗滌3次。

3. 加ABC,37℃反應(yīng)30分鐘。0.01M TBS洗滌5次。

4. TMB37℃反應(yīng)20-25分鐘。

5. 加入TMB終止液,讀數(shù)。

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小牛血清(輻照滅菌)100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
大牛血清(輻照滅菌)100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
無(wú)菌過(guò)濾動(dòng)物血清系列
胎牛血清(無(wú)菌過(guò)濾)100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
特級(jí)新生牛血清(無(wú)菌過(guò)濾)100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
優(yōu)級(jí)新生牛血清(無(wú)菌過(guò)濾)100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
標(biāo)準(zhǔn)新生牛血清(無(wú)菌過(guò)濾)100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
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