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小鼠超氧陰離子自由基(O28226)ELISA試劑盒

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更新時(shí)間:2018-04-01 01:56:31瀏覽次數(shù):251次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

卡邁舒化學(xué)技術(shù)(上海)有限公司專業(yè)研發(fā)銷售各種屬科研ELISA試劑盒,并提供無(wú)償代檢測(cè)服務(wù),是國(guó)內(nèi)多家科研機(jī)構(gòu)及高校的ELISA試劑盒專業(yè)供應(yīng)商,小鼠超氧陰離子自由基(O28226)ELISA試劑盒質(zhì)量保證,*,發(fā)貨及時(shí),運(yùn)輸嚴(yán)格,周到的服務(wù)團(tuán)隊(duì)竭誠(chéng)為您的科研之路保駕護(hù)航!如需其它種屬試劑盒可~

詳細(xì)介紹

小鼠超氧陰離子自由基(O28226)ELISA試劑盒使用目的:

為定量(性)測(cè)定活化的目標(biāo)濃度的血清,血漿,組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清及其他生物液體,僅用于科研,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。

實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被目標(biāo)物抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)物呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

小鼠超氧陰離子自由基(O28226)ELISA試劑盒組成

名稱 96孔配置 48孔配置 備注 

微孔酶標(biāo)板 12×8 12×4 無(wú) 

標(biāo)準(zhǔn)品 0.5mL*6 0.5mL*6 按說(shuō)明書(shū)復(fù)溶 

* 10mL 10mL 無(wú) 

檢測(cè)抗體-HRP 10mL 5mL 無(wú) 

20×洗滌緩沖液 25mL 15mL 按說(shuō)明書(shū)稀釋 

底物A 6mL 3mL 無(wú) 

底物B 6mL 3mL 無(wú) 

終止液 6mL 3mL 無(wú) 

封板膜 2 2 無(wú) 

說(shuō)明書(shū) 1 1 無(wú) 

自封袋 1個(gè) 1個(gè) 無(wú) 

小鼠超氧陰離子自由基(O28226)ELISA試劑盒樣本處理及要求

1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4夜后于2000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8 2000g離心30分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:2000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注:標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。

需要而未提供的試劑和器材

1. 酶標(biāo)儀(450nm

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL200-1000uL

3. 37恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

小鼠超氧陰離子自由基(O28226)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)

1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。

3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

4. 底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。

6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。

7. 平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。

9. 不能使用過(guò)期產(chǎn)品。

10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。

試劑準(zhǔn)備

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。

1. 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶:試劑盒提供6管標(biāo)準(zhǔn)品,每管已標(biāo)定濃度,并且凍干。實(shí)驗(yàn)前在每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品管中加入0.5mL*,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)助其溶解,使其恢復(fù)為每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品管身標(biāo)注的濃度。

2. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按120稀釋,即120×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

小鼠超氧陰離子自由基(O28226)ELISA試劑盒操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL

3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4-5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6. 每孔加入底物AB50μL,37避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD

小鼠超氧陰離子自由基(O28226)ELISA試劑盒 其它相關(guān)試劑盒*:

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小鼠腎素(Renin)ELISA試劑盒      Mouse Renin ELISA Kit
小鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒      Mouse nitric oxide,NO ELISA Kit
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小鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒      Mouse free fatty acids,FFA ELISA Kit
小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒      Mouse Substance P,SP ELISA Kit
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