ELISA試劑盒zui常用的標(biāo)本是血清，血漿通?？梢暈榕c血清同等的標(biāo)本，標(biāo)本致使的假陽性和假陰性成果主要是攪擾性物質(zhì)所形成的，分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種：
內(nèi)源性物質(zhì)有人以為大概40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性攪擾物質(zhì)，能夠不一樣程度影響檢查成果。
多見的攪擾物質(zhì)有：類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異 性抗體、嗜靶抗原本身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig （s）抗體、穿插反響物質(zhì)和等。 
（1）類風(fēng)濕因子 人血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子（RF）能夠與ELISA體系中的捕獲抗體及酶符號(hào)二抗的FC段直接，然后致使假陽性。
處理該情況的方法是：
①用F（ab）2代替完好的IgG；
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性（63℃，10 min）IgG的固相吸附劑處理（將熱變性IgG參加到標(biāo)本稀釋液中同樣有效）；
③檢查抗原時(shí)，能夠用2-巰基乙醇等參加到標(biāo)本稀釋液中，使RF降解。
（2）補(bǔ)體 ELISA體系中固相一抗和符號(hào)二抗過程中，抗體分子發(fā)作變構(gòu)，其FC段的補(bǔ)體C1q分子位點(diǎn)被露出出來，使C1q 能夠?qū)⒍哌B接起來，然后形成假陽性。
ELISA試劑盒處理的方法是：
①用EDTA稀釋標(biāo)本；
②用53℃，10 min或56℃，30 min加熱血清使C1q滅活。
（3）嗜異性抗體 人類血清中含有能與嚙齒類動(dòng)物（如鼠等）Ig （s） 的天然嗜異性抗體，可將ELISA體系中一抗和二抗連接起來，也能形成假陽性。
處理的方法是：
可在標(biāo)本稀釋液中參加過量的動(dòng)物Ig （s） ，但參加量缺乏或亞類不一樣時(shí)無效。
也含親水基團(tuán)，其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵，然后削弱蛋白質(zhì)與固相載體的，并借助于親水基團(tuán)和水分子的效果，使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀態(tài)，然后脫離固相載體。
洗滌液中的非離子型洗滌劑通常是吐溫20，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高于0.2%時(shí)，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低實(shí)驗(yàn)的靈敏度。
洗液需求稀釋，應(yīng)按要求稀釋。制造洗液使用新鮮的和高質(zhì)量的純化水，電導(dǎo)率小于1.5μs/cm，ELISA試劑盒洗液假如結(jié)晶應(yīng)待其融解后制造。
手洗條件一致性較差，對(duì)成果影響較大，避免洗液在孔內(nèi)形成氣泡。
半自動(dòng)與全自動(dòng)冼板機(jī)使用不當(dāng)也會(huì)影響成果，血清中殘留的的纖維蛋白絲或洗滌液分出的結(jié)晶易使洗板機(jī)針小孔全堵塞或半堵塞狀態(tài)，形成未符號(hào)酶洗脫不*，致使“花板”形成假陽性或假陰性；
ELISA試劑盒操作洗板機(jī)過程中要不時(shí)調(diào)查洗板機(jī)針孔內(nèi)洗液的曉暢情況，及時(shí)糾正，洗板機(jī)不用時(shí)使用去離子水清冼幾遍。