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當(dāng)前位置:上海酶聯(lián)生物研究所>>技術(shù)文章>>試劑盒的五大檢測方法
zui近,站上關(guān)于ELISA試劑盒的談?wù)撎臃浅6?,今天也宣告一下自己的一些觀點(diǎn),對ELISA的見地有不對的當(dāng)?shù)兀Mm正或許直接拍磚。首要,談一下商場。首要RnD和Bender等一些的ELISA試劑盒仍是很值得信任的,也得到了商場的認(rèn)可,特別是RnD的盒子,我們賣的很好,就是價格好貴,經(jīng)費(fèi)不是很富余的實(shí)驗(yàn)室難消費(fèi)的起。國內(nèi)的廠家,質(zhì)量在活絡(luò)度上和RnD的盒子仍是有很大距離,但是有一點(diǎn)是能夠必定的,盒子反映的結(jié)果是公正客觀的。還有一個缺陷就是廠家可供挑選的盒子種類比較少,首要會集在炎癥細(xì)胞因子上。
第二,談一下怎樣活絡(luò)運(yùn)用ELISA這個檢測方法以及怎樣去挑選ELISA試劑盒。ELISA這個方法的原理,我們都很清楚,網(wǎng)上的資料一大堆。可真實(shí)用起來的時分,有時分就有點(diǎn)犯模糊,我談一下自己的了解。
1、有些客戶會用OVA(卵清蛋白)做一些哮喘,過敏性腸炎的模型,后來會檢測粘膜特異性的sIgA以及血清里面IgG,IgE等方針。當(dāng)客戶向我咨詢購買這幾個方針的盒子的時分,我很必定地說這些方針的檢測要你自己特制,不會有商品化的盒子出售的。
2、ELISA試劑盒關(guān)于一些小分子的檢測,比如前列腺素、糖皮質(zhì)激素的檢測,我的了解是要用競爭法ELISA去檢測,也要購買選用這個方法的盒子。一般細(xì)胞因子的檢測,都是選用常規(guī)的夾心法ELISA檢測,由于因子分子量比較大,一般10幾個KD左右,很簡略找到兩個或許多個抗原表位。而小分子很難找到兩個不同的表位,也就抉擇了包被抗體和檢測抗體無法一起結(jié)合小分子并固相化。解決方案就是酶標(biāo)板上包被二抗,每個孔參與一定量的酶標(biāo)的小分子,然后加樣品,再加不帶符號的檢測抗體,顯色底物。樣品的目的小分子的含量越高,吸光度越低。
3、關(guān)于胰島素的檢測,我仍是引薦millpore 旗下LInco公司的檢測試劑盒,不管是放免仍是ELISA,傳聞權(quán)在他們手中。
4、做實(shí)驗(yàn)面向的ELISA試劑盒種屬首要是人,大鼠和小鼠,現(xiàn)在市面上雞、牛、馬、羊、兔各種方針的盒子都有售,真不知道這些抗體是怎樣來的,。據(jù)我所了解,這些炎癥方針仍是有很大種屬特異性的。
5、許多客戶有個誤區(qū),拿來一個方針就想當(dāng)然地嘗試用ELISA去檢測,其實(shí)應(yīng)該多動腦,該檢測活性的檢測活性,該做western的做western。ELISA試劑盒檢測方法簡略,活絡(luò)度高.
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