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上海酶聯(lián)生物研究所

ELISA試劑盒進口大鼠選擇合適的實驗操作與保溫條件

時間:2019-3-21閱讀:373
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ELISA試劑盒進口大鼠如何保溫:
溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反應一般在37℃經(jīng)1~2小時,產(chǎn)物的生成可達。為加速反應,可提高反應的溫度,有些試驗在43℃進行,但不宜采用更高的溫度??乖贵w反應4℃更為*,在放射免疫測定中多使反應在冰箱中過夜,以形成zui多的沉淀。但因所需時間太長,在ELISA試劑盒中一般不予采用。
實驗條件:
1. 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
2. ELISA試劑盒進口大鼠包被抗體或抗原的選擇:將抗體或抗原吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
3. 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定。然后再固定其它條件或采取“方陣法”,在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
Schizandrol A    五味子酯甲    HPLC≥98%    20mg/支
Schisandrol B    五味子醇乙    HPLC≥98%    20mg/支
Nicotinamide    *    HPLC≥99.5%    50mg/支
Crocin    西紅花苷(藏紅花素,番紅花苷)    Standard(標準)    20mg/支
Crocin I    西紅花苷I    HPLC≥97%    20mg/支
Crocin II    西紅花苷II    HPLC≥98%    20mg/支
Morin    桑色素    HPLC≥98%    20mg/支
D-(−)-Quinic acid    D-(-)-奎寧酸    ≥98%    20mg/支
catalpol    梓醇    HPLC≥98%    20mg/支
phloridzin    根皮苷    HPLC≥99%    20mg/支

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