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當(dāng)前位置:上海酶聯(lián)生物研究所>>技術(shù)文章>>ELISA加抗體標(biāo)本
1.洗滌板:可以說(shuō)在ELISA操作中,洗刷是zui首要的關(guān)鍵技術(shù)。因?yàn)榫郾揭蚁┑人芰蠈?duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,為到達(dá)分離游離的和結(jié)合的酶符號(hào)物的意圖,鏟除殘留在板孔中游離的物質(zhì),以及非特異性地吸附的攪擾物質(zhì),在洗刷時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的攪擾物質(zhì)洗刷下來(lái)。所以在洗板時(shí)會(huì)有一定差錯(cuò),人為因素很大(當(dāng)然有條件的用洗板機(jī)除外),洗的不*或串了孔,對(duì)如此靈敏的ELISA體系可是不小的影響。
2.顯色:顯色體系又許多,我們一開(kāi)始做的時(shí)分,要選擇適宜的顯色體系.留意顯色體系酶活性底物的保存HRP結(jié)合物加硫柳泵,AP結(jié)合物可加疊氮鈉.
3.加抗體標(biāo)本(和二抗):留意該換槍頭時(shí)換槍頭.標(biāo)本稀釋一般可用pbs稀釋,也可用封閉液去稀釋.如需加二抗,還要留意二抗的工作濃度,太高zao蹋,太低則著色淺.
4.每次做盡量要把陰陽(yáng)空三個(gè)對(duì)照做好,如出現(xiàn)問(wèn)題也好剖析.ELISA
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